一起由金黄色葡萄球菌合并变形杆菌引起的食物中毒分析.docx

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一起由金黄色葡萄球菌合并变形杆菌引起的食物中毒分析

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【摘要】2012年我市发生一起多人食物中毒事件，患者先后出现恶心、呕吐、腹部疼痛和腹泻等急性胃肠炎症状，共采集样品10份，其中患者呕吐物2份、剩余卤牛肉1份、剩菜2份、患者服药前肛拭子5份。经检测得出食物中毒是由被金黄色葡萄球菌合并变形杆菌污染的卤牛肉引起。

【关键词】金黄色葡萄球菌变形杆菌食物中毒实验室检测

R155A2095-1752（2013）16-0386-02

2012年我市发生一起多人食物中毒事件，患者先后出现恶心、呕吐、腹部疼痛和腹泻等急性胃肠炎症状。经我中心现场人员采样送检，送予本实验室检测，检测结果分析如下：

1资料与方法

1.1流行病学调查

经调查，患病的15名人员于2012年8月15日中午在该公司食堂就餐，于15：00至18：00陆续出现恶心、呕吐、腹部疼痛和腹泻等急性胃肠炎症状。均主诉午餐吃过卤牛肉、凉拌海蜇等食物。病人经使用抗菌素和对症治疗后，于8月18日全部出院，无死亡病例。

1.2实验室检验

1.2.1样品采集

共采集样品10份，其中患者呕吐物2份、剩余卤牛肉1份、剩菜2份、患者服药前肛拭子5份。

1.2.2材料

所使用的BPW、TTB、SC、志贺氏菌增菌肉汤、7.5%氯化钠肉汤、GN、葡萄糖肉浸液肉汤、APW、BS、HE、SS、MYP、EMB购自杭州微生物试剂有限公司；Baird-parker平板购自广东环凯微生物科技有限公司；沙门显色培养基、弧菌显色培养基、O157显色培养基、李斯特显色培养基购自上海科玛嘉微生物技术有限公司；三糖铁琼脂、血琼脂平板购自北京陆桥技术有限责任公司；生化鉴定试剂购自生物梅里埃中国有限公司，均在有效期内使用。

1.2.3检验方法

按照《食品卫生微生物学检验》GB／T4789，进行金黄色葡萄球菌、志贺氏菌、沙门氏菌、溶血性链球菌、副溶血性弧菌、蜡样芽胞杆菌、变形杆菌的鉴定培养。经实验室鉴定排除志贺氏菌、沙门氏菌、溶血性链球菌、副溶血性弧菌和蜡样芽胞杆菌。证实为金黄色葡萄球菌与变形杆菌合并感染，现将检验结果报告如下。

2结果

2.1病原学检测

2.1.1直接涂片染色

将患者呕吐物2份、剩余卤牛肉1份、剩菜2份、患者服药前肛拭子5份经革兰氏染色镜检，其中1份患者呕吐物、1份卤牛肉可见葡萄状革兰氏阳性球菌[1]与其他革兰氏阴性杆菌。

2.1.2细菌生长形态

以无菌操作分别取患者呕吐物2份、剩余卤牛肉1份、剩菜2份、患者服药前肛拭子5份直接接种于BS、HE、SS、MYP、EMB、Baird-parker平板、沙门显色培养基、弧菌显色培养基、O157显色培养基、李斯特显色培养基按GB／T4789要求培养。同时称取卤牛肉、2份病人呕吐物各25g（ml），接种于BPW、志贺氏菌增菌肉汤、7.5%氯化钠肉汤、葡萄糖肉浸液肉汤、GN、APW按GB／T4789要求培养。

2.1.3平板生长形态观察

于血琼脂平板上透明溶血、白色、圆形、微凸起、表面光滑湿润、边缘整齐，约4mm菌落。染色为革兰阳性球菌，呈葡萄状排列。并伴有大量迁徙生长细菌；Baird-parker平板上有黑色、周围有晕的小菌落；EMB上有不发酵乳糖细小菌落。

在血平板上首日无法分离纯菌落，在空白血平板上覆盖少量95%乙醇，于恒温培养箱中烘干，再接种，于第二日可分离得纯菌落。[2]

2.1.4形态观察

将挑取的可疑菌落进行革兰染色，镜检为革兰阳性葡萄状球菌和革兰氏阴性杆菌。

2.1.5生化鉴定

aird-parker平板上黑色菌落以梅里埃葡萄球菌乳胶凝集试剂盒快速检测，得乳胶凝集，阳性结果。

对革兰阳性葡萄球菌用生物—梅里埃API—staph鉴定试纸条进行生化鉴定，结果为金黄色葡萄球菌，生化反应谱：6736157，鉴定百分率为98.5%，补充试验：触酶阳性，鸟氨酸阴性。

对革兰阴性葡萄球菌用生物—梅里埃API—20E鉴定试纸条进行生化鉴定，结果为奇异变形杆菌，生化反应谱：0536000奇异变形杆菌鉴定百分率为ID：99.9%，补充实验：苯丙氨酸酶试验阳性。[3]

2.1.6血浆凝固酶试验

对革兰阳性葡萄球用生物—梅里埃兔血浆进行血浆凝固酶试验，结果为阳性。[4]

3讨论

由于引起细菌性食物中毒的病原菌较多，在鉴定初期为了减少盲目性，可先将检测样直接涂片染色镜检来确定可疑细菌，从而有侧重的进行检测，而减少因为盲目筛选而花费大量人力物力与宝贵的检验时间。

经流行病学调查及实验室检测结果，确定该起食物中毒，是由食入被金黄色葡萄球菌与变形杆菌污染的卤牛肉所引起。在调查中发现，该校的卫生设施简陋，从业人员的卫生意识淡薄。夏季是细菌性食物中毒的高发季，卫生监督人员应加大对食品生产地的食品安全检查，以保证市民食品安全。

参考文献

[1]斯国静；王一泓；俞骅；韦东芳；高