几丁质酶毕赤表达系统的构建及其果蔬采后抑菌机理研究的开题报告.pdfVIP

几丁质酶毕赤表达系统的构建及其果蔬采后抑菌机

理研究的开题报告

一、研究背景

从果蔬采摘到销售过程中，由于外界环境条件和微生物污染的影响，

常常会导致果蔬的质量下降和变质，甚至对人体健康产生威胁。因此，

开发一种有效的果蔬保鲜技术，对保障人们的食品安全和健康具有重要

意义。

近年来，几丁质酶作为具有广泛应用前景的一种酶类，在果蔬保鲜、

纺织印染、纸张制造、制药等领域中得到了广泛的应用。尤其是在果蔬

保鲜领域中，几丁质酶可以针对果蔬表面的几丁质进行水解处理，使得

极性不同的有机物离子和磷酸盐离子从果蔬表面释放出来，减少果蔬表

面对细菌的滋生，达到较好的保鲜效果。

因此，本研究拟采用几丁质酶毕赤酵母表达系统，构建几丁质酶表

达体系，并通过其抑制果蔬上一些常见细菌的能力，探究其在果蔬保鲜

方面的应用前景。

二、研究内容

1.构建几丁质酶表达体系

在本研究中，将利用毕赤酵母表达系统作为几丁质酶表达的载体。

通过分别设计合成几丁质酶基因与载体，并通过电转化法将质粒转化入

毕赤酵母细胞中，构建几丁质酶表达的体系。

2.确定最佳表达条件

通过改变表达体系中的温度、pH值、诱导剂浓度等因素，寻找最佳

的几丁质酶表达条件，并采用SDS和Westernblot等方法验证表

达效果。

3.探究抑菌机理

将采集的新鲜果蔬经过一定时间的处理后，注入不同浓度的几丁质

酶，观察果蔬微生物菌落数的变化，得到几丁质酶对果蔬细菌生长的抑

制效果，并通过金属离子和蛋白质变性剂等处理方式验证其可能的作用

机理，探究其在果蔬保鲜方面的应用前景。

三、研究意义

本研究将构建几丁质酶表达体系，并探究其在果蔬保鲜方面的应用

前景和抑菌机制，为果蔬保鲜领域中的加工及其提高商品附加值作出贡

献，同时也为几丁质酶在其他领域中的应用提供了新的思路和实践基础。