HJ 1000-2018 水质 细菌总数的测定 平皿计数法.docxVIP

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目次

前言 ii

1适用范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4方法原理 1

5干扰和消除 1

6试剂和材料 2

7仪器和设备 2

8样品 2

9分析步骤 3

10结果计算与表示 4

11精密度和准确度 5

12质量保证和质量控制 5

13废物处理 6

附录A(资料性附录)细菌总数检验记录及报告推荐格式 7

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前言

为贯彻《中华人民共和国环境保护法》和《中华人民共和国水污染防治法》,保护生态环境,保障人体健康,规范水中细菌总数的测定方法,制定本标准。

本标准规定了测定地表水、地下水、生活污水和工业废水中细菌总数的平皿计数法。

本标准的附录A为资料性附录。本标准为首次发布。

本标准由生态环境部生态环境监测司、法规与标准司组织制订。本标准起草单位:辽宁省环境监测实验中心。

本标准验证单位:大连市环境监测中心、丹东市环境监测中心站、锦州市环境监测中心站、辽阳市环境监测站、沈阳市疾病预防控制中心和辽宁北方环境检测技术有限公司。

本标准生态环境部2018年12月26日批准。

本标准自2019年6月1日起实施。本标准由生态环境部解释。

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水质细菌总数的测定平皿计数法

1适用范围

本标准规定了测定水中细菌总数的平皿计数法。

本标准适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中细菌总数的测定。

2规范性引用文件

本标准引用了下列文件或其中的条款。凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。

GB/T14581水质湖泊和水库采样技术指导HJ494水质采样技术指导

HJ/T91地表水和污水监测技术规范

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.1

细菌总数totalbactEria

36℃培养48h,样品在营养琼脂上所生长的需氧菌和兼性厌氧菌菌落总数。3.2

菌落形成单位CoIony-formingunits(CFU)单位体积样品中的细菌群落总数。

4方法原理

将样品接种于营养琼脂培养基中，在特定的物理条件下(36℃培养48h)培养，生长的需氧菌和兼性厌氧菌总数即为样品中细菌菌落的总数。

5干扰和消除

5.1活性氯具有氧化性，能破坏微生物细胞内的酶活性，导致细胞死亡，可在样品采集(8.1)时加入硫代硫酸钠溶液(6.5)消除干扰。

5.2重金属离子具有细胞毒性，能破坏微生物细胞内的酶活性，导致细胞死亡，可在样品采集(8.1)时加入乙二胺四乙酸二钠溶液(6.6)消除干扰。

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6试剂和材料

除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂或生物试剂，实验用水为蒸馏

水或去离子水。

6.1营养琼脂培养基。

成分：

蛋白陈

牛肉膏氯化钠琼脂

10g

3g

5g

15~20g

将上述成分或含有上述成分的市售成品溶解于1000ml水中，调节PH至7.4~7.6,分装于玻璃容器中，经121℃高压蒸汽灭菌20min,储存于冷暗处备用。避光、干燥保存，必要时在5℃±3℃冰箱中保存，不得超过1个月。配制好的营养琼脂培养基不能进行多次融化操作，以少量勤配为宜。当培养基颜色变化或脱水明显时应废弃不用。

6.2无菌水：取适量实验用水，经121℃高压蒸汽灭菌20min,备用。

6.3硫代硫酸钠(Na2S203·5H2O)。

6.4乙二胺四乙酸二钠(C1OH?4N208Na2·2H2O)。

6.5硫代硫酸钠溶液：P(Na2s203)=0.10g/ml

称取15.7g硫代硫酸钠(6.3),溶于适量水中，定容至100ml,临用现配。

6.6乙二胺四乙酸二钠溶液：P(cioHi4N208Na2·2H20)=0·15gml

称取15g乙二胺四乙酸二钠(6.4),溶于适量水中，定容至100ml,此溶液可保存为30d。

6.7玻璃珠：直径3~8mm。

7仪器和设备

7.1采样瓶：250ml带螺旋帽或磨口塞的广口玻璃瓶。

7.2高压蒸汽灭菌器：115℃、121℃可调。

7.3恒温培养箱：允许温度偏差36℃±1℃