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摘要肝素是重要的药物原料,低分子量肝素从肝素中制备得来,在医学上具有比肝素更优越的性能和更低的副作用。肝素酶酶解法是制备超低分子量肝素的重要方法之一,具有化学法和物理分离法所没有的优势,而提高肝素酶酶活是适应超低分子量肝素工业生产的关键。
本课题组前期已完成pEAS-1b-H1质粒的构建并成功导入E.coliBL21中,其中pEAS-1b是带有多克隆位点的热自裂解质粒,H1是肝素酶基因。同时课题组已成功建立使E.coliBL21-pEAS-1b-H1表达出肝素酶以及检验其酶活的方法。为进一步提高肝素酶基因表达的肝素酶的酶活水平,本实验设计以上述肝素酶基因为初始基因(长度为
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