生物制品中DNase残留检测-核酸荧光底物法.docxVIP

生物制品中DNase残留检测-核酸荧光底物法.docx

  1. 1、本文档共9页,可阅读全部内容。
  2. 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
  3. 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  4. 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
  5. 5、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
  6. 6、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们
  7. 7、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
  8. 8、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多

GB/TXXXXX—XXXX

ICS65.020.20

CCSB38

团体标准

T/FDSAFORMTEXTXXXXX—FORMTEXTXXXX

FORMTEXT?????

生物制品中DNase残留检测-核酸荧光底物法

DetectionofDNaseresiduesinbiologicalproducts-Nucleicacidfluorescencesubstratemethod

(征求意见稿)

FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX发布

FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX实施

FORMTEXT中国食品药品企业质量安全促进会??发布

T/FDSAXXXX—202X

T/FDSAXXXX—202X

PAGE

PAGEII

PAGE

PAGEI

目次TOC\o1-2\h\z\u

前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4原理 1

5试剂和材料 1

6仪器和设备 2

7分析步骤 2

8结果分析 3

8.1定性分析 3

8.2定量分析 3

8.3定量限 3

8.4重复性 3

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件中的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由中国食品药品企业质量安全促进会提出并归口。

本文件起草单位:武汉瀚海新酶生物科技有限公司、国家药品监督管理局疫苗及生物制品质量监测与评价重点实验室、中生复诺健生物科技(上海)有限公司、江苏申基生物科技有限公司、苏州艾博生物科技有限公司、北京引正基因科技有限公司、深圳市晋百慧生物有限公司、惠正奇医药(广州)有限公司、广州正达医药科技有限公司、百奥泰生物制药股份有限公司、深圳深信生物科技有限公司。

本文件主要起草人:杨广宇、耿玉杰、李梁、严壮、陆家海、叶宇翔、武飞飞、竺添、沈明云、顾文艺、于磊、黄贤明、梅雄、李文华。

PAGE

PAGE4

PAGE

PAGE5

生物制品中DNase残留检测-核酸荧光底物法

范围

本标准规定了使用核酸荧光底物法测定生物制品中脱氧核糖核酸酶残留量检测的方法。

本标准适用于使用核酸荧光底物法测定生物制品中脱氧核糖核酸酶残留量检测。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成对本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法

术语和定义

脱氧核糖核酸酶deoxyribonuclease,DNase

水解脱氧核糖核酸(DNA)中磷酸二酯键,生成寡核苷酸或单核苷酸的核酸酶。

脱氧核糖核酸酶IdeoxyribonucleaseI,DNaseI

水解单链和双链DNA,产生具有5’-磷酸末端的单核苷酸或寡核苷酸的核酸内切酶。

脱氧核糖核酸酶I活力单位activityunitofdeoxyribonucleaseI

在37℃、pH7.6的溶液中,10分钟内完全降解1μgofpBR322DNA所需的酶量

注:一个酶活单位以U表示。

原理

试样与核酸荧光底物一起孵育,试样中残留的DNase催化核酸荧光底物分解,降解产物在对应波长的激发下会发出荧光,通过荧光检测器检测,外标法定量,测定DNase的含量。

试剂和材料

符合GB/T6882规定的二级水。

0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷盐酸盐溶液(Tris-HCl)缓冲液,pH7.6

精密称取12.12gTris-base,缓慢加入HCl调pH至7.6(25℃),混匀后定容至1000mL。高温高压灭菌,根据每次测试量分装,于-20℃放置储存。

0.01mol/L三羟甲基氨基甲烷-乙二胺四乙酸溶液(Tris-EDTA)缓冲液,pH8.0

精密称取0.61gTris-base,0.19gEDTA-2Na·2H2O,溶于水中,缓慢加入NaOH或HCl调pH至8.0(25℃),混匀后定容至1000mL。高温高压灭菌,根据每次测试量分装,于-20℃放置储存。

核酸荧光底物

人工合成的DNA,带有荧光基团和淬灭基团,其中荧光基团的激发和发射波长为Ex/Em=485nm/525nm。干粉形式的核酸荧光底物于-20℃避光储存。

仪器和设备

文档评论(0)

睿智的P社玩家 + 10 + 关注
实名认证
文档贡献者

该用户很懒,什么也没介绍

1亿VIP精品文档

相关文档