2024-2025学年高二生物选择性必修3（人教版）上课课件第3章- 第1节 重组DNA技术的基本工具.pptx

第;1.阐明重组DNA技术所需要的三种基本工具的作用。

2.认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。

3.进行DNA的粗提取与鉴定。;;;;;从社会中来;从社会中来;;;[资料1]1970年，史密斯（H.D.Smith)等人首次从大肠杆菌中提取出了一种限制性内切核酸酶（restrictionendonuclease)。这种内切核酸酶能够识别特定的脱氧核苷酸序列，并在特异性的位点上把双链DNA分子“切割”开（如图)。DNA被切割后所产生的交错的切口，也就是在每条链的一端留下的单链末端，叫做黏性末端。;1.从微生物体内分离出来

2.每种限制酶只能识别DNA分子中的特定脱氧核苷酸序列，并在特定位置将DNA分子“切割”开。

3.“切割”的是磷酸二酯键

4.切口有两种：黏性末端和平末端;3.“切割”的是磷酸二酯键;[资料2]1967年，科学家们发现了一种能够将两个DNA片段连接起来的酶，可以用它来修复DNA链的断裂口，并把这种酶叫做DNA连接酶。1970年，科学家们又提取了一种具有更高活性的T4DNA连接酶。当两个DNA片段的黏性末端彼此相临，而且它们的碱基能够互补配对时，DNA连接酶就能把它们之间的缝隙“缝合”起来（如图）。;[资料3]1972年，美国的伯格（P.Berg)等人用一种限制性内切酶在体外分别将猿猴体内的一种病毒的DNA和λ噬菌体的DNA进行酶切，然后分离出各自的酶切片段，又用T4DNA连接酶将它们连接起来，构建了世界上首例体外重组的杂合DNA分子。;1.基因针线——DNA连接酶

（T4连接酶和E·coli连接酶）

将切割下来的DNA片段拼接成新的DNA分子，要靠DNA连接酶（DNAligase)来实现。当两个DNA片段的黏性末端彼此靠拢，相互识别，它们的碱基完成互补配对后，DNA连接酶就把它们之间的缝隙“缝合”起来。;[资料4]1973年，美国科学家科恩（S.Cohen)等人从大肠杆菌中提取出了两种质粒，一种含有卡那霉素抗性基因，另一种含有四环素抗性基因。他们将这两种基因分别“切割”下来，并拼接在同一个质粒上，然后导入大肠杆菌，产生了既抗卡那霉素又抗四环素的大肠杆菌。;（1）常用的工具：质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒。

（2）质粒：一种较为理想的载体，它是独立于细菌拟核之外的很小的双链环状DNA分子??具有自我复制能力。有一个至多个限制酶切割位点，并含有一些抗生素抗性基因（如图）,如四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因等，这些基因可以作为鉴定和筛选重组DNA的标记基因。

（3）作为运载体应具有的特征：能自我复制；有一个或多个酶切位点；有启动子、终止子和标记基因。;;;;;;;易错易混;例下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性内切核酸酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是（）

A.①②③④ B.①②④③

C.①④②③ D.①④③②;基因工程

的工具;1、以下有关基因工程的叙述，不正确的是（）

A.基因工程的原理是通过对DNA分子操作实现基因重组

B.不同生物共用一套遗传密码为基因工程提供了理论依据

C.不同生物的DNA结构大致相同是重组DNA形成的保障

D.基因工程工具酶的发现为目的基因导入受体细胞创造了条件 ;【解析】基因工程是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫重组DNA技术，其原理是广义上的基因重组，A项正确。地球上几乎所有的生物体共用一套遗传密码，因此一种生物的基因能在另一种生物体内表达，B项正确。不同生物的DNA具有相同的结构和化学组成，因此不同生物的DNA能够连接在一起，C项正确。基因工程工具酶的发现为基因工程获取目的基因并构建基因表达载体提供了技术保障，D项错误。

【答案】D;2.限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶，以下说法正确的是（）

A.DNA连接酶能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯键

B.限制酶只能切割双链DNA片段，不能切割烟草花叶病毒的核酸

C.E.coliDNA连接酶既能连接黏性末端，也能连接平末端

D.限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，所以也能剪切自身的DNA;【答案】B

【解析】DNA连接酶连接的是两个DNA片段，A项错误；限制酶只能切割双链DNA片段而不能切割RNA，烟草花叶病毒的核酸为RNA，B项正确；E.coliDNA连接酶只能连接黏性末端，不能连接平末端，C项错误；限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，但是因为原核生物DNA分子中不存在