使用体内DTI和DTT的方法量化评价脊髓损伤的条件是：临床前期在狨猴的纵向研究PPT课件.pptx

使用体内DTI和DTT的方法量化评价脊髓损伤的条件是：临床前期在狨猴的纵向研究

;摘要：;背景介绍;更进一步，另外的实验组报道了研究者成功的将DTI用作临床评价人类脊髓损伤的工具，脊髓这些研究并没有被详细的组织学检查或者行为学分析确认。使用啮齿类动物脊髓损伤模型的少数ＤＴＩ研究，揭示了一些形态学和功能恢复的联系。这些结果某些程度广泛应用于灵长类动物也是未知的，因为在皮质脊髓束通路在啮齿类和灵长类动物之间有明显神经解剖学上的不同。然而，猫的模型是接近灵长类的，结果使用此模型表现相似。从临床应用观点看，使用非人类的灵长类ＳＣＩ模型，体内DTI和DTT与组织学和行为学分析相比较的研究，为了确定DTT结果的准确性和重要性是必需的。

之前在成熟的狨属建立一个可重复的SCI模型，并且报道过人体干细胞/前体细胞移植到损伤脊髓促进了功能恢复的研究。使用这种灵长类动物模型，研究者揭示了DTT准确反映了轴突解剖状态以及在脊髓半切中轴突损伤的程度。在灵长类动物中脊髓挫伤类似于人类慢性SCI。在现阶段研究，我们做了一系类狨属脊髓创伤后的ＤＴＩ和ＤＴＴ，并且比较了组织学检测和行为学分析的结果。研究者的发现证实了在非人类灵长类动物脊髓损伤后DTI和DTT分析是有用性。

;材料和方法

;核磁共振

全麻，7T核磁。损伤后2,4,15获取Ｔ２ＷＩ和ＤＴＩ图像，为了减少来自血管和颈部脊髓运动伪影，动物被固定于特殊的线圈内以及心电图探测针依附于动物的腹侧胸椎。扫描参数：TR，3500ms；TE，40ms;翻转家哦哦哦，90度;FOV,40*40mm;数据矩阵，128*128；重建图像的分辨率，0.31*0.31mm;层厚，0.94mm;b值，1000S/mm2

弥散张量分析

弥散张量和成形术分析.扩散张量的特征值代表了椭圆的三个轴向，也就是，最长值，中间值，最短值（所谓特征值），分别为λ1,λ2,andλ3。特征值λ1代表为局部纤维方向。FA被普遍用来的各向异性指数。各向同性，λ1=λ2=λ3，且FA=0.由于各向异性增加，λ1?λ2=λ3，FA接近于1.扩散各向异性的方向被跟踪直达成形术停止。连续体素的翻转角度设定为5O度。

;研究者使用连两个感兴趣区域的方法来客观量化损???脊髓的DTT纤维。设定两个ＲＯＩｓ来跟踪整个脊髓的轴向切片的FA图像的整体轮廓，包括白质和灰质。ROI放置在损伤头端的4mm和尾端的4mm.估计DTT纤维通过ＲＯＩｓ脊髓损伤前后。评价了ＲＯＩｓ径向扩散(λ⊥=(λ2+λ3)/2)，径向扩散（λ∥=λ1），以及ＦＡ值。在损伤中心的背侧束，和皮质脊髓束，损伤中心距头，尾端４ｍｍ和损伤中心头尾端８ｍｍ处。成像术参数：翻转角度：３５度，最小长度值，１.５ｍｍ；绘制导管方法（半径＝０.２５，数据源数量为5），FA彩标（红色表示高各向异性，蓝色表示低各向异性）。研究增加了在损伤中心的节段ＦＡ图来表明通过损伤中心椎体束的位置。（如图５Ｂ）

;４．组织学分析

损伤１５Ｗ后使用４％多聚甲醛灌流，取出脊髓，放置在４％的多聚甲醛中后固定，１０％后固定过夜继而换成３０％蔗糖。冰冻切片，轴向切片，１６微米厚。ＨＥ和ＬＦＢ染色评价髓鞘的面积。免疫组化ＲＴ９７，标记剩余轴突中的神经丝。ＳＭＩ－３１，标记正常轴突的磷酸化的神经丝。研究者计算ＲＴ９７或者ＳＭＩ－３１阳性面积作为剩余轴突纤维的marker,目的是为了使用DTT检测SCI后剩余轴突与组织学方法检测轴突相比较。

二.依据于DTT纤维计数比与依据于组织学纤维计数比

研究者确定HSFR是在整个轴突切片范围内损伤中RT-97/SMI-31阳性面积比上在整个轴突中这些纤维的面积。确定DFER为损伤后各个时间点DTT纤维评估数量比上使用纤维示踪计数侧得SCI前DTT纤维数量。

行为学评价

比较啮齿类，狨猴运动是复杂的且涉及到直立和水平位置（站立，跳跃，攀爬笼子，抓笔）。在现在的研究中，使用开放评价方法评价狨猴，两位观察者（盲测）SCI后每周三次直到第四周，此后每周一次。

;自行运动活动的测量

用红外系统测量自发运动。在损伤前一个月把狨猴送到装有红外控制系统的笼子里目的是获取损伤前的数据。此后，被单独关在笼子里（宽820，深610，高1600mm）,装有红外的笼子为（宽350.深500，高500），持续记录动物三维运动。每只动物每天每小时持续记录，损伤后的活动量作为损伤前数值的百分比记录。

抓笔实验

使用抓笔实验来评价上肢运动力量，此项评价了动物的抓握反射（当动物尝试抓取放在其面前的物品时所从事的运动）。每隔两三天做一次，一天三次。最大抓取量/损伤前的百分数被记录。

攀爬实验

此实验室是用来评价前后肢的协调性。总之，如果把狨猴放在笼子的