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化妆品包材绿脓杆菌检测;01;1;02;02;3.绿脓菌色素测定用培养基
成分:蛋白胨20g
氯化镁1.4g
硫酸钾10g
琼脂18g
甘油(化学纯)10g
蒸馏水1000mL
制法:将蛋白胨、氯化镁和硫酸钾加到蒸馏水中,加温使溶解,调pH至7.4,加入琼脂和甘油,加热溶解,分装于试管内,115°C(10lb)20min高压灭菌后,制成斜面备用。;5.硝酸盐蛋白胨水培养基
成分:蛋白陈10g
酵母浸膏3g
硝酸钾2g
亚硝酸钠0.5g
蒸馏水1000mL
制法:将蛋白陈和酵母浸膏加到蒸馏水中,加温使溶解,调pH为7.2,煮沸过滤后补足液量,加入硝酸钾和亚硝酸钠,溶解混匀,分装到加有小倒管的试管中,115°C(10lb)20min灭菌后备用。;02;02;2.分离培养:从培养液的薄菌膜处挑取培养物,划线接种在十六烷三甲基溴化铵琼脂平板上,置37℃培养18-24h。凡绿脓杆菌在此培养基上,其菌落扁平无定型,向周边扩散或略有蔓延,表面湿润,菌落呈灰白色,菌落周围培养基常扩散有水溶性色素,此培养基选择性强,大肠艾希氏菌不能生长,革兰氏阳性菌生长较差。
在缺乏十六烷三甲基溴化铵琼脂时也可用乙酰胺培养基进行分离,将菌液划线接种于平皿中,放37℃培养24h,绿脓杆菌在此培养基上生长良好,菌落扁平,边缘不整,菌落周围培养基略带粉红色,其他菌不生长。;;;6.硝酸盐还原产气试验:挑取被检的纯培养物,接种在硝酸盐胨水培养基中,置37℃培养24h,观察结果。凡在硝酸盐胨水培养基内的小倒管中有气体者,即为阳性,表明该菌能还原硝酸盐,并将亚硝酸盐分解产生氮气。
7.明胶液化试验,取绿脓杆菌可疑菌落的纯培养物,穿刺接种在明胶培养基内,置37°C培养24h,取出放冰箱10-30min,如仍呈溶解状时即为明胶液化试验阳性,如凝固不溶者为阴性。
8.42℃生长试验:挑取纯培养物,接种在普通琼脂斜面培养基上,放在41-42℃培养箱中,培养24-48h,绿脓杆菌能生长,为阳性,而近似的荧光假单胞菌则不能生长。;02;谢谢
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