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岛津液相色谱仪使用注意事项
日期-7-2查看:2189
岛津液相色谱仪使用注意事项
1.流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其它物质(使用
0.45um或更细的膜过滤)。
2.流动相过滤后要用超声波脱气,脱气后应该恢复到室温后使用。
3.不能用纯乙腈作为流动相,这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。
4.使用缓冲溶液时,做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时,然后用甲醇
(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上,以充分洗去离子。对于柱塞杆外部,做完样品后也必须用
去离子水冲洗20ml以上。
5.长时间不用仪器,应该将柱子取下用堵头封好保存,注意不能用纯水保存柱子,而应该
用有机相(如甲醇等),因为纯水易长霉。
6.每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。
7.C18柱绝对不能进蛋白样品,血样、生物样品。
8.堵塞导致压力太大,按预柱混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗。清
洗方法;①以异丙醇作溶剂冲洗:②放在异丙醇中间用超声波清洗;⑧用10%稀硝酸清洗。
9.气泡会致使压力不稳,重现性差,因此在使用过程中要尽量避免产生气泡。
10.如果进液管内不进液体时,要使用注射器吸液:一般在输液前要进行流动相的清洗。
11.要注意柱子的PH值范围,不得注射强酸强碱的样品,特别是碱性样品。
12.更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗,然后插入新的流动相
中。更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。
液相色谱柱使用经验谈
色谱柱在使用前,最好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化
的参考。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;
另外,在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳
条件),只有这样,测得的结果才有可比性。
1、样品的前处理:
a、最好使用流动相溶解样品。
b、使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。
c、使用0.45µm的过滤膜过滤除去微粒杂质。
2、流动相的配制:液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的,
因此要求流动相具备以下的特点:
a、流动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱
中)。
b、流动相具有一定惰性,与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。
c、流动相的黏度要尽量小,以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果;同时降低柱
压降,延长液体泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。
d、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UV检测器,最好使用对紫外吸收
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较低的溶剂配制。
e、流动相沸点不要太低,否则容易产生气泡,导致实验无法进行。
f、在流动相配制好后,一定要进行脱气。除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测,还
能够防止流动相中的微量氧与样品发生作用。
3、流动相流速的选择:因柱效是柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同
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