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易宁更年颗粒制备工艺、质量控制及初步药效学研究

更年期(Menopause)通常是指卵巢功能旺盛状态逐渐衰退直至完全消失的一

个过渡时期,而更年期综合征(Menopausalsyndrome,MPS)则是大多数妇女在更

年期随着月经周期、激素水平等的变化所导致的一系列以自主神经系统功能紊乱

为主,且伴有神经心理症状的一组症候群。在此期间,随着性激素水平的变化大多

数妇女都会伴有不同程度的疾病,如：月经失调、抑郁、情绪波动大、乳腺癌、

烦躁失眠、性器官性功能减弱、免疫功能下降等一系列综合征。

并且随着社会发展节奏和人口老龄化的提高,越来越多的人们受到更年期综

合征疾病的影响。本研究中的易宁更年方为一经验方,由女贞子、墨旱莲、哈蟆

油、当归和川芎五味药材组成,具有补肾益精、滋阴养血、行气开郁的功效,用于

女性进入围绝经期或卵巢功能下降导致的一系列症状。

且该方一直以汤剂用于临床,治疗妇女围绝经期综合征具有很好的疗效。由

于其存在服用不便,剂量不准,质量不稳定等不足而导致不能进一步推广。

本研究选用的颗粒剂服用、储运、携带方便,服用量减少,且质量稳定,适合

机械化生产。因此,拟根据药材主要有效成分对处方药物进行提取,浓缩,制成颗

粒剂,建立其质量标准并进行药效学初步研究。

目的结合传统中医药理论和现代化实验技术优化易宁更年颗粒(Yining

GengnianGranules,YNGN)的制备工艺；建立易宁更年颗粒的质量标准；观察成

品的初步稳定性；建立小鼠免疫低下模型评价工艺改变前后药效学的差异：为该

制剂的工艺优化以及进一步的临床研究提供可靠的理论依据。方法1.易宁更年

颗粒工艺优化本研究根据药材的主要功效成分,选取高效液相色谱法(HPLC法)

测定特女贞苷含量,以特女贞苷含量和浸膏得率为综合评价指标,通过正交试验

筛选墨早莲和女贞子药材浸泡时间、加水量、提取时间与提取次数；根据当归和

川芎挥发油的提取量考察加水量、粒度、提取时间对水蒸气蒸馏提取工艺的影响：

为保持挥发油的性质采用环糊精进行包合,并根据包合前后挥发油利用率筛选包

合工艺的环糊精和挥发油的加入比例、包合温度和包合时间；最后将药液合并,

浓缩,干燥,选择合适的辅料将得到的各中间体进行合并制粒,并根据相关规定对

颗粒休止角、堆密度、临界相对湿度等进行验证；采用免疫低下模型小鼠对工艺

改变前后的免疫功能药效学进行初步比较。

2.易宁更年颗粒质量标准根据《中国药典》2010版一部要求,采用薄层色谱

法(TLC)进行女贞子、当归和墨早莲进行定性鉴别。同上根据《中国药典》2010

版一部要求,采用HPLC法进行哈蟆油定性鉴别和特女贞苷的含量测定。

哈蟆油定性鉴别色谱条件分别为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂

(AgilentHC-C18柱)；水为流动相；检测波长为215nm。色谱柱：流速：0.7ml/min。

检测时间30min。理论板数按1-甲基海因峰计算应不低于2000。

特女贞苷含量测定色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Agilent

HC-C18柱),以甲醇-水(35：65)为流动相,检测波长为224nm,流速为1.0ml/min,

检测时间30min,柱温为30℃。初步稳定性：取模拟市售包装的成品制剂在室温

条件下放置三个月,分别取0个月、1个月、2个月、3个月这四个时间点,在相

同的色谱条件下进行含量测定。

根据《中国药典》2010版检查颗粒剂的一般考察项目：如性状、粒度、水

分、溶化性、装量差异、重金属和砷盐等。3.易宁更年颗粒初步药效学选用昆明

种雌性小鼠,采用前三天连续腹腔注射环磷酰胺(80mg/kg)(CY),后每周强化注射

一次的方法建立小鼠免疫低下模型。

试验动物分组及给药剂量分别为：模型组(等体积的溶剂)、易宁更年颗粒高

剂量组(含生药材9.6g/kg)、中剂量组(含生药材6.4g/kg)、低剂量组(含生药

材3.2g/kg)、原工艺汤剂组(含生药材6.4g/kg)和阳性对照组(3.3g/kg),造

模的同时开始灌胃给药,每天一次,连续给药15天(d)后,分别观察原工艺汤剂组、

模型组、阳性药物组及高、中、低剂量易宁更年颗粒对免疫低下模型