UPLC_MSMS和HPLC_MSMS操作规程_原创文档.pdfVIP

ABSCIEXTRIPLEQUADTM5500的PPG质量准确度校准

操作规程

一、前期准备

1、PPG稀释溶液的准备，对于5500系列采用的标准溶液：

正离子模式：POSPPG2E-7M；负离子模式：NEGPPG3E-5M

2、离子源的垂直旋钮调至“5”位。

3、用质谱仪上的针泵式进样针吸取适量的PPG校准液，检查管路是

否连接好。

二、操作步骤

1、双击“HardwareConfiguration”，激活“MSOnly”。

2、菜单栏切换到“Installation”项目。

3、双击“ManualTurning”，打开手动调谐界面。

4、点击“OpenFile”，选择相对应的采样方法（Q1PosPPGs.dam；

Q3PosPPGs.dam；Q1NegPPGs.dam；Q3NegPPGs.dam），先正离

子再负离子，先Q1调谐再Q3调谐，扫描速率依次为10、200、1000、

2000Da/s，对应MCA分别为10、50、50、100。

5、点击“StartSyringePump”，再点击“Start”开始采集数据。

6、将会在界面上出现采集到的质谱图，右键点击右侧质谱图区域，

选择“OpenDate”。

7、点击工具栏中的“CalibrationFromSpectrum”。

8、在弹出的菜单中选择合适的校验标准，在“Standard”中选择对应

的校准溶液，点击“Start”开始校准前的计算。

9、第一个图形代表的是此次校准与理论值的质量偏差，各点应位于

“±0.1Da”线内。若某质量点超出了设定的范围，则应点击“Update

MassCalibration”，更新那些偏离的质量点的电场参数，使之落到“

±0.1Da”线内。

10、第二个图形代表的是PPG校准峰的半峰高宽度，各点应位于

“0.6~0.8”范围内。若某点质谱峰半峰宽超出标准范围，点击界面上

的“Advanced”按钮，调节对应的“Offset”电压，使之合规。

质谱分辨率质谱半峰宽（FHWM）

Offset值增加提高减小

Offset值降低降低增加

11、第三个图形代表的是此次校准与上次校准所有PPG校准点峰强

度变化的百分比。

14、待校准完成后，点击“Stop”停止进样，并灭活“MassOnly”。

三、结束工作

针泵吸取50%甲醇水溶液，对管路进行冲洗，2~3次即可。

标准品质谱条件调谐（TuneandCalibrate）

操作规程

一、前期准备

1、检查离子源是否干净，将垂直旋钮跳到“5”位。

2、用50%甲醇水溶液（乙腈水溶液也可）配置20~50ng/mL的标准

溶液（根据响应值调节浓度，将目标化合物母离子与周围离子响应值

相差明显即可）。

√正离子化合物，可添加0.1%甲酸√负离子化合物，无需添加

二、操作步骤

1、创建project：打开Analyst软件，在菜单栏中打开“Tools”，选择

“project”下的“CreateProject”，输入“Projectname”即可。

2、双击“HardwareConfiguration”，激活“MSOnly”，双击“Manual

Tuning”，打开调谐界面。

3、Q1Scan：在当前界面设置扫描模式为“Q1MS（Q1）”，将扫描范

围设为100~MW+30，扫描速率为200Da/s，Duration为5min，先点

击“StartSyringePump”，再点击“Start”，找到目标化合物母离子。

待扫描完成后，选择“Center/Width”，将目标母离子的m/z输入“Center

（Da）”中，“Width（Da）”设置为3，“Scan