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- 2024-10-13 发布于江西
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酶活性浓度测定的
主要影响因素及控制
酶(enzyme)酶的应用临床诊断酶学产生至今已有100年的历史。用于诊断的酶类已超过100多种,常用的数十种。酶测定约占目前临床化学总工作量的1/4到1/2。酶的概念是一种由活细胞产生,具有高度专一性、高度催化活性的特殊蛋白质,又称为生物催化剂。酶的测定方法分为绝对定量法和相对定量法两大类,以后者为主。酶催化化学反应的能力称为酶活性(activity)。酶活性浓度的测定受许多因素的影响。
酶活性浓度测定的主要影响因素1.标本及标本采集和处理因素2.试剂及方法学因素3.仪器因素的影响4.测定条件与参数设置
1.标本及采集和处理的影响因素1.1溶血1.2抗凝剂1.3温度1.4空气与光线1.5标本副反应1.6酶蛋白浓度1.7其他
1.1溶血最重要的影响是RBC内酶的大量释出。大部分酶在细胞内外浓度差异明显,且其活性远高于血清;如RBC内的LD、AST和ALT活性分别较血清中高100、15和7倍左右。RBC释放的Hb在300~500nm可见光波段能使吸光度值明显升高,干扰分光光度计的测定。
1.1Hb的吸光度曲线
1.1溶血影响的控制减少溶血体外溶血可通过实施样品制备技术的标准化加以克服;分清体内溶血与体外溶血。减少溶血的干扰可通过设置样品对照,或使用双波长比色、连续监测法以及改进商品试剂等措施,克服对分光光度分析的影
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