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第5章细胞的能量供应和利用
第4节光合作用与能量转化
一、捕获光能的色素和结构
1.太阳光能的输入、捕获和转化，是生物圈得以维持运转的基础。光合作用是唯一能够捕获和转化光能的生物学途径。
2.实验：绿叶中色素的提取和分离
（1）实验原理
实验
原理
提取色素
绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中
无水乙醇
分离色素
绿叶中的各种色素都能溶解在层析液中，但不同色素的溶解度不同；溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，反之则慢。因而色素就会随着层析液在滤纸上的扩散而分开
层析液
（2）注意事项
①二氧化硅：有助于研磨的充分。
碳酸钙：防止研磨中色素被破坏。
研磨液过滤：单层尼龙布。
②制备滤纸条要剪去一端的两角：防止出现边缘效应，两边色素扩散的快，保证色素带整齐。
滤液细线的要求：防止色素带重叠而影响分离效果。
重复画滤液细线2-3次，是为了积累更多的色素。
层析时不能让滤液细线触及层析液，防止色素溶解于层析液中而无法分离。
实验结果
胡萝卜素：
胡萝卜素：橙黄色
叶黄素：黄色
叶绿素a：蓝绿色
叶绿素b：黄绿色
类胡萝卜素（含量约占1/4）：主要吸收蓝紫光
叶绿素（含量约占3/4）：主要吸收蓝紫光和红光
①色素带的条数与色素种类有关，四条色素带说明有四种色素。
②色素带的宽窄与色素含量有关，色素带越宽说明此种色素含量越多。色素带最宽（色素含量最多）的是叶绿素a，色素带最窄（色素含量最少）的是胡萝卜素。
③色素带扩散速度与色素在层析液中的溶解度有关，扩散速度越快说明溶解度越高。溶解度最高的是胡萝卜素。
（4）实验异常现象分析：
Ⅰ、滤纸条未见色素带的原因：①忘记画滤液细线；②滤液细线接触到层析液，使得色素溶解于层析液中；③用水进行绿叶中色素的提取。
Ⅱ、滤液绿色过浅的原因：①未加二氧化硅，研磨不充分；②取材不好，叶片不够新鲜，不是浓绿色；③加入无水乙醇过多，提取浓度太低；④未加CaCO3或加入过少，色素分子被破坏。
Ⅲ、滤纸条色素带重叠的原因：①滤液细线不直；②滤液细线过粗。
3．影响叶绿素合成的因素
（1）光照：光是叶绿素合成的必要条件，植物在黑暗中叶片呈黄色。
（2）温度：低温抑制叶绿素的合成，破坏已有的叶绿素分子，从而使叶片变黄。（秋天叶子变黄）
（3）镁等无机盐：镁是构成叶绿素的重要成分，缺镁叶片变黄。
4．叶绿体中色素的吸收光谱分析
（1）色素吸收光的范围：一般叶绿体中的色素只吸收可见光（可见光的波长范围大约是390～760nm），对红外光和紫外光不吸收。
（2）类胡萝卜素不吸收红光
（3）不同波长的光=不用颜色的光=光质
（4）不同颜色温室大棚的光合效率
①无色透明大棚日光中各色光均能透过，有色大棚主要透过同色光，其他光被其吸收，所以无色透明的大棚光合效率最高。
②若需补光（单色光），则同一光照强度下，补蓝紫光、红光效果最好。
③叶绿素对绿光吸收最少，因此绿色塑料大棚光合效率最低。
5．叶绿体的结构适于进行光合作用
（1）恩格尔曼的两个实验
①水绵（叶绿体呈螺旋带状分布，便于观察）和需氧细菌（确定释放氧气多的部位）；无空气的黑暗环境排除了氧气和光的干扰；用极细的光束照射，叶绿体上有光照多和光照少的部位，相当于一组对比实验；临时装片暴露在光下的实验再一次验证了实验结果。
结论：直接证明了叶绿体能吸收光能用于光合作用放氧。
②三棱镜实验：需氧细菌集中在红光和蓝紫光区域，说明色素主要吸收红光和蓝紫光用于光合作用放出氧气。
二、光合作用的原理
1．
希尔
发现在离体叶绿体的悬浮液中加入铁盐或其他氧化剂（悬浮液中有H2O，没有CO2），在光照下可以释放出O2。像这样，离体叶绿体在适当条件下发生水的光解，产生氧气的化学反应称作希尔反应。
此实验能说明氧气的产生和糖类的合成不是同一化学反应
鲁宾和
卡门
用同位素示踪的方法，研究了光合作用中氧气的来源
H218O＋CO2→18O2
H2O＋C18O2→O2
结论：光合作用释放的O2中的氧元素来自H2O
阿尔农
发现在光下，叶绿体可合成ATP。1957年，他发现该过程总是与水的光解相伴随
2．反应式
CO2＋H2O（CH2O）＋O2
6CO2＋12H2OC6H12O6＋6O2＋6H2O
3．光合作用的过程
项目
光反应
暗反应
场所
叶绿体类囊体的薄膜
叶绿体基质
条件
光、色素、酶
酶、NADPH、ATP等
物质变化
（1）H2OO2＋H＋
（2）NADP＋＋H＋→NADPH
（3）ADP＋PiATP
（1）CO2＋C52C3
（2）2C3（CH2O）＋C5
能量变化
光能→ATP和NADPH中活跃的化学能→有机物中稳定的化学能
联系
光反应为暗反应提供NADPH和ATP，
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