3.2 光合作用——光能的捕获和转换.docxVIP

第三章细胞中能量的转换和利用

第二节光合作用——光能的捕获和转换

一、解开光合作用之谜

1.海尔蒙特的“柳树实验”：树木只要有水，就能生长发育。（错误，未考虑到光，空气，无机盐等）

2.英格豪斯实验：绿色植物只有在光下才能产生气体。（他不知到气体是什么）

3.萨克斯实验：叶片在光下能产生淀粉。（对照实验）

4.鲁宾和卡门实验：光合作用释放的氧气来自于水。（同位素标记法）

5.卡尔文实验：发现CO2被用于合成糖类等有机物的途径——卡尔文循环。（同位素标记法）

6.恩格尔曼实验：叶绿体中含有能有效吸收利用蓝光和红光的物质，这些物质吸收的光与绿叶在光下产生氧气有关。

实验设计巧妙之处：

（1）材料选择得好：①水绵→具有螺旋带状叶绿体便于观察研究；

②好氧细菌→只能在有氧的环境中生存，因此能准确地氧气产生的部位。

（2）条件控制得好：①黑暗、没有空气→排除环境中光和O2的影响，保证实验的准确性；

②极细的光束照射水绵→叶绿体可分为光照多和光照少部位→对比实验；

③水绵完全暴露在光下→黑暗条件下局部光照和完全曝光→验证实验。

二、提取和分离叶绿体中的光合色素

实验：绿叶中色素的提取和分离

1.实验原理

①提取原理→绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇/95%的乙醇＋无水碳酸钠/丙酮。

②分离原理→绿叶中的色素在层析液中的溶解度不同。

溶解度高的色素随层析液在滤纸条上扩散的速度快，反之则慢。

2.实验步骤

①提取色素

剪：选取5g浓绿色的新鲜叶片→色素含量高；剪去主叶脉，剪碎。

磨：SiO2→增大摩擦力，有助于研磨充分；CaCO3→防止叶绿素分子被破坏（中和液泡中的有机酸从而保护叶绿素）；无水乙醇→溶解色素（5mL，防止挥发）；迅速、充分地研磨→防止无水乙醇挥发和提取较多色素。

滤：用单层尼龙布过滤（叶脉和SiO2）→不用滤纸（因为会吸附色素）；收集滤液到试管，及时用棉塞将试管口塞严→防止无水乙醇挥发和色素氧化。

②分离色素——纸层析法

制：滤纸条干燥处理→使层析液在滤纸上扩散速度快；剪去两角→防止两侧色素扩散快，导致色素带不整齐（弧形带）；1cm处铅笔划线→不可用圆珠笔划线（含色素）。

画：用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀地画出一条细线，要求：细、齐、直；待滤液干后→若未干就继续画会导致色素带重叠；再重复画一到两次→积累更多色素，使色素带清晰，便于观察/防止色素过少，分离现象不明显。

析：将适量层析液倒入试管/烧杯中；将滤纸条插入层析液中→注意：滤液细线不能触及层析液（防止色素溶解层析液中而不能在滤纸上扩散）；用棉塞塞紧试管口/用培养皿皿盖住烧杯→防止层析液挥发（有毒）。

3.实验结果

种类

颜色

扩散速度

溶解度

含量

吸收光谱

胡萝卜素

橙黄色

最快

最大

最少

类胡萝卜素1/4

蓝紫光

叶黄素

黄色

较快

较大

较少

叶绿素a

蓝绿色

较慢

较小

最多

叶绿素3/4

红光

蓝紫光

叶绿素b

黄绿色

最慢

最小

较多

4.实验改编

分离绿叶中的色素，也可用下图所示的方法：即在圆心处滴加适量滤液，干燥后再滴加适量层析液进行层析，结果会出现不同颜色的4个同心圆，则它们由内到外依次对应哪种色素及颜色？

胡萝卜素：橙黄色、叶黄素：黄色、叶绿素a：蓝绿色、叶绿素b：黄绿色。

5.异常现象分析

（1）滤纸条上色素带过浅

A.叶绿素两条带过浅：

①叶片不新鲜，叶绿素含量少；

②未加CaCO3，叶绿素被破坏；

③未加SiO2，研磨不充分。

B.色素带均过浅

④加入无水乙醇过多，提取浓度低；

⑤画滤液细线过浅。

（2）滤纸条上无色素带

①忘画滤液细线；

②滤液细线触及层析液，且时间较长，色素全部溶解在层析液中。

（3）滤纸条上色素带重叠

①滤液细线不细、不齐、不直。

②滤纸未经过干燥处理。

三、光合作用的过程

1.1940年前后，希尔在研磨绿叶后制取叶绿体悬液，并向悬液中加入草酸铁，经过光照后发现，Fe3+被还原为Fe2+，同时离体的叶绿体释放出了氧气。

希尔反应仅说明了离体叶绿体在适当条件下可以发生水的光解产生氧气但不能说明O2中的O全部来自水（鲁宾和卡门实验说明氧气来自于水）。

2.叶绿体

成为光合作用的场所的原因：

①类囊体堆叠成基粒，增大了叶绿体膜的表面积。

②叶绿体内部巨大的膜表面上，分布着大量光合色素。

③类囊体膜上和叶绿体基质中，有许多与光合作用有关的酶。

在光照较弱的情况下，叶绿体会汇集到细胞顶面，以最大限度地吸收光能，保证高效率的光合作用；而当光照强度