细菌和病毒的遗传转化接合.ppt

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F因子及其在杂交中的行为F因子在宿主染色体上有许多特定的插入位点和方向,整合频率为每代10-5~10-7。性伞毛形成结合桥/管,产生核酸内切酶,该酶在oriT转移起始点处一条单链上切开一个口,供体DNA从5′末端开始向受体转移。P218-220第31页,共46页,星期六,2024年,5月接合过程:F+和F-的杂交细菌间接触→接合管形成→单链断裂—单链DNA从供体向受体转移→环化(F+→F-)或DNA双链的形成(部分二倍体)(Hfr→F-)→重组交换(奇偶次交换)。第32页,共46页,星期六,2024年,5月接合过程:F+和F-的杂交第33页,共46页,星期六,2024年,5月F因子的特点F+细菌可以把F因子传给后代。F+细菌经吖啶橙处理F因子丢失,丢失后不再出现。F+可以和F-杂交,而不能和F+杂交。F+和F-杂交后代皆为F+,而且可以以10-7频率获得重组体后代。第34页,共46页,星期六,2024年,5月Hfr和F-杂交仅有一部分F因子(近原点处)被转移;受体获得完整的F因子--这种情况频率非常低。高频重组:细菌重组子频率为10-4。P219第35页,共46页,星期六,2024年,5月接合过程:Hfr和F-杂交第36页,共46页,星期六,2024年,5月细菌重组特点:只有偶数次交换才能产生平衡的重组子。相反的重组子不出现,所以在选择性培养基上只出现一种重组子。部分二倍体/部分合子图10-18细菌部分二倍体的形成及单交换和双交换的结果知识要点:p219第37页,共46页,星期六,2024年,5月奇偶次交换第38页,共46页,星期六,2024年,5月(三)、中断杂交试验作图雅各布(Jacob,F)和沃尔曼(Wollman,E.)著名的中断杂交试验(interruptedmatingexperiment)。试验材料:Hfr:thr+leu+aziStonSlac+gal+strsF–:thr–leu–aziRtonRlac–gal-strRP231thr、leu、lac、gal分别代表苏氨酸、亮氨酸、乳糖和半乳糖,+代表原养型或发酵型,–代表营养缺陷型或不发酵型;azi和tonA分别代表叠氮化纳和T1噬菌体;Str表示链霉素,r代表抗性,s代表敏感。第39页,共46页,星期六,2024年,5月理解细菌和病毒在遗传研究中的优越性和意义;掌握转化、接合、性导与转导的概念与基本原理;掌握F-菌株、F+菌株、Hfr菌株的概念、区别和用途;区别F因子、F′因子的异同;了解温和性噬菌体、烈性噬菌体的生活周期;掌握原噬菌体、溶源性细菌的概念;了解细菌和病毒遗传作图的原理和基本过程。本章要求第40页,共46页,星期六,2024年,5月W.Hayes关于E.coliK12菌株A、B的实验(1952)链霉素处理A菌完全培养基培养一段时间洗涤离心B菌重组体未减少基本培养基链霉素处理B菌完全培养基培养一段时间洗涤离心A菌无重组体产生基本培养基结论:细菌接合过程中遗传物质的转移是单向的,即遗传物质从A株转移到了B株。阻碍细菌分裂,并不杀死细菌第41页,共46页,星期六,2024年,5月致育因子的发现Astrs♂↓放置冰箱一年Bstrs♀×Astrs“♂”↓↓诱变分离不育AF+strs↓放置冰箱一年BF-strs×AF-strs↓↓str诱变分离不育AF-strr×AF+strs↓BF-strs×AF+strr↓可育↓str诱变分离

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