临床真菌学检验基本技术专家讲座.pptVIP

临床真菌基础总论一、真菌基本介绍二、真菌分类及存在形式三、真菌普通检验★普通镜检★常规染色★培养及判定方式四、真菌致病性五、真菌防治标准临床真菌学检验基本技术专家讲座第1页

●真菌(fungus)属真核细胞型微生物,有真正核,单细胞或多细胞异养微生物,不含叶绿素,大都能形成硬多糖细胞壁,细胞壁结构较细菌简单,细胞壁含几丁质和纤维素。●预计有100-150万种,分布广泛,从30000米高空—地表—海洋都有真菌生长。●大多数真菌对人类是有益,只有少数对人类有害。一、真菌基本介绍临床真菌学检验基本技术专家讲座第2页

二、真菌分类及存在形式A、真菌分类从米奇里（P.A.Micheli，1729）开始，至今已经有近280年历史，这期间经过世界上无数真菌科学工作者努力，使真菌分类工作有了极大地发展。B.不过因为真菌分类存在着无数困难，现有真菌分类系统还有待深入发展与完善（还未有一个大家供认系统）。（1）、真菌分类临床真菌学检验基本技术专家讲座第3页

1、Ainsworth（1973）分类系统特点：成立菌物界，分2门，真菌门下分成5个亚门；取消藻状菌纲，依据鞭毛有没有划分成鞭毛菌亚门、接合菌亚门。2、AlexopoulosMims（1979）分类系统特点：成立菌物界，菌物界Myceteae、Fungi分3个门；真菌类依鞭毛有没有分2门。3、菌物分别归属藻界、真菌界、和原生生物界分类系统特点：将藻界、真菌界、和原生生物界分开成三个独立界属二、真菌分类及存在形式临床真菌学检验基本技术专家讲座第4页

与医学相关真菌有四个亚门接合亚门:毛霉、根霉等子囊霉亚门:酵母菌属、小孢子霉属等担子霉亚门:新生隐球菌、灵芝、食用菌等半知霉亚门:假丝酵母菌属、球孢子菌属等最新真菌分类接合菌门子囊菌门担子菌门壶菌门临床真菌学检验基本技术专家讲座第5页

依据菌落形态分类:酵母菌酵母样菌霉菌双相真菌临床真菌学检验基本技术专家讲座第6页

二、真菌分类及存在形式（2）、真菌存在形式菌丝和孢子A、真菌菌丝先端为生长点，经过顶端延长而生长。菌丝生长生出分枝，使其与营养基质接触面积增大，提升吸收力。菌丝内原生质从衰老部分流向幼嫩部分，使菌丝不停伸长，这就是生长。B、在一定条件下由生长转入发育阶段即产生繁殖体，生长与发育受环境控制，多数真菌在贫养和低温条件下转入有性阶段，少数菌在高温下转入有性阶段。还有些真菌在其不一样发育阶段，必须在不一样寄主植物上渡过，即转主寄主（现象）。C.只要是专门生殖细胞，正常情况下不需要两两结合就能够单个细胞发育成一个个体，这就是孢子。临床真菌学检验基本技术专家讲座第7页

菌丝形态:螺旋状、球拍状、结节状、鹿角状、梳状等,菌丝形态有利于判别真菌。孢子形态:有性孢子:同一个菌体或不一样菌体上两个细胞融合成经减数分裂形成。无性孢子:细胞分化或出芽形成。形态有分生孢子、叶状孢子和孢子囊孢子。临床真菌学检验基本技术专家讲座第8页

菌丝和孢子临床真菌学检验基本技术专家讲座第9页

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三、真菌普通检验（1）、普通镜检A.氢氧化钾法将标本置于在玻片上,加一滴10%KOH浮载液,盖上盖玻片放置5~10分钟后或直接在火焰上快速经过2~3次微加热,轻压盖玻片驱逐气泡并将标本压薄后置于显微镜下检验。先在低倍镜下观察有没有菌丝和孢子,然后用高倍镜观察孢子和菌丝形态特征、大小和排列等。对于角质标本,必要时可在10%KOH溶液中,加入终浓度为40%二甲亚砜,促进其溶解。此法适合用于皮屑、甲屑、毛发、痂皮、痰、组织、耵聍、粪便等标本直接涂片检验。临床真菌学检验基本技术专家讲座第11页

B.胶带粘贴法三、真菌普通检验（1）、普通镜检用透明胶带直接贴于取材部位,数分钟后揭下,充分展平后,直接置贴于加有一滴浮液载玻片上此液能够是10%~20%KOH,也能够采取乳酸酚棉蓝染液（易于观察）。该法惯用于花斑癣患处直接检验。临床真菌学检验基本技术专家讲座第12页

三、真菌普通检验（2）、常规染色乳酸酚棉蓝染色传统染色法,酵母菌细胞、菌丝体和产孢结构等皆可被染成亮蓝色；背景为暗淡蓝色。过碘酸-雪夫染色（P.A.S）在寻找真菌孢子、判别真菌、观看真菌结构、等方面有意义其它染色法六胺银法、爱先蓝（alcianblue）法、革兰氏染色法、以及特殊染色法临床真菌学检验基本技术专家讲座第13页

于洁净载玻片上，滴1-2滴乳酸酚棉蓝染色液，用解剖针从霉菌菌落边缘外取少许带有孢子菌丝