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高效液相色谱—紫外检测法测定糕点中纳他

霉素的含量

作者：朱聿元李红梅周露

来源：《绿色科技》2017年第20期

摘要：建立了高效液相色谱-紫外检测法测定糕点中纳他霉素含量的实验方法。色谱柱采

用WatersC18柱（250mm×4.6mm，5μm），以甲醇+乙酸水溶液（10%）=60∶40为流动

相，采用紫外检测器测定了糕点中纳他霉素的含量。纳他霉素的线性范围分别为5～100

μg/mL，检出限为0.5μg/mL，加标回收率为97.2%～100.3%，相对标准偏差0.98%。结果表

明：该方法简单、快速、准确、重现性好，适用于糕点中纳他霉素的定量分析。

关键词：纳他霉素；糕点；高效液相色谱；紫外检测器

中图分类号：TS207.4

文献标识码：A文章编号（2017

引言1

纳他霉素[1，2]分子式为C33H47NO13，分子量为665.73。微溶于水、甲醇，溶于稀酸、

冰醋酸及二甲苯甲酰胺，难溶于大部分有机溶剂，纳他霉素是很好的真菌抑制剂，既能抑制真

菌，又能抑制真菌毒素的产生。纳他霉素安全性能好，因为其难以被人体消化道吸收，微生物

不容易产生抗体，通常喷雾方式用于食品表面的防霉变防腐。1997年我国卫生部正式批准纳

他霉素作为食品防腐剂。在GB2760-2014《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》中规定

糕点中纳他霉素的限量值为0.5g/kg。目前，纳他霉素在文献中报道的分析方法有导数光谱法

[3]、紫外分光光度法[4，5]、生物检测法[6]、液相色谱法[7～13]、液质联用法[14～16]等。笔

者应用高效液相色谱-紫外检测器检测方法对糕点中纳他霉素含量的测定进行了研究。

材料与2方法

材料和仪2.1器

实验材料：纳他霉素（Dr.Ehrenstorfer）、糕点（市场购买）；甲醇（色谱纯），aladdin

公司。

实验仪器：E2695/2489液相色谱-紫外检测器，Waters公司；超纯水机，美国MILLIPORE

公司；BSA224S电子天平，瑞士万通公司。

实验方法2.2

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2.2.1色谱条件选择

色谱柱：WatersC8柱（250mm×4.6mm，5μm），WatersC18柱（250mm×4.6mm，5

μm）；流动相：甲醇+乙酸水溶液（10%）=60∶40；紫外检测器：305nm；进样量10μL；

流速1.0mL/min。

选择流动相，甲醇+乙酸水溶液（10%）选择了20∶40；40∶60；60∶40三种比例，慢慢

增加甲醇的比例，发现在甲醇+乙酸水溶液（10%）=60∶40时候，标准品达到很好的基线分

离。

2.2.2标准溶液配制

称取纳他霉素标准品1mg，用甲醇溶解后定容至10mL容量瓶中，摇匀，该溶液作为标

准储备溶液。准确移取上述溶液0.5、1、2.5、5、10mL分别置于10mL容量瓶中，用流动相

定容，摇匀，经0.45μm滤膜过滤，取滤液备用，配成5、10、25、50、100μg/mL标准品溶

液。

2.2.3样品溶液配制

准确称取5g左右制备样，加入甲醇30mL超声30min，加水10mL，通过离心机4000

r/min离心10min，取上清液过0.22μm滤膜后供液相色谱测定用。

结果与讨论3

线性关系的考察3.1

精密吸取纳他霉素标准溶液10μL，注入高效液相色谱仪，记录色谱图。纳他霉素标准品

的回归方程为：y=1.33E+005x-1.24E+005，R2=0.999002。结果表明纳他霉素在5～100μg/mL

之间线性关系良好。信噪比等于3为标准，计算纳他霉素的检出限为0.5μg/mL。见图1。

精密3.2度试验

精密吸取标准品溶液10μL重复进样6次，记录色谱图峰面积，并测定峰面积的平均值和

相对标准偏差，测定结果见表1。结果显示相对标准偏差为0.76%，本检测方法具有良好的准

确度