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一、实验目的二、实验原理三、实验材料四、实验仪器、药品五、实验步骤六、实验结果和分析七、实验注意事项一、实验目的了解人工诱发多倍体植物的原理、方法及其在植物育种上的意义。掌握鉴定植物多倍体的方法。掌握植物染色体压片技术。学习计数植物细胞染色体数目。二、实验原理染色体组(n):自然界各种生物的染色体数目是相当恒定的,遗传学上把二倍体生物一个配子的染色体数称为染色体组。染色体基数(x):一个基本染色体组所含的染色体数。双倍体(2n):具有两套染色体组的生物。多倍体:细胞内多于两套染色体组的生物。多倍体普遍存在于植物界,目前已知道被子植物中有1/3或更多的物种是多倍体。也可以采用高温、低温、x射线照射、嫁接和切断等物理方法人工诱发。人工诱发多倍体的方法
物理方法:温度骤变、机械创伤、辐射处理等都有可能诱发多倍体的产生。化学方法:秋水仙素,异生长素,富民农等。组织培养法:在细胞、愈伤组织培养中常发现染色体倍性的变化,从中可以筛选和培养出多倍体植株。
如石刁柏、胡萝卜胚乳培养可以获得多倍体体细胞杂交(或原生质体融合)可创造异源多倍体。在诱发多倍体方法中,以应用化学药剂更为有效。如秋水仙素,其主要作用是抑制细胞分裂时纺锤体的形成,使染色体不走向两极而被阻止在分裂中期,这样细胞不能继续分裂,从而产生染色体数目加倍的核。若染色体加倍的细胞继续分裂,就形成多倍性的组织,由多倍性组织分化产生的性细胞,所产生的配子是多倍性的,因而也可通过有性繁殖方法把多倍体繁殖下去。多倍体的特点
巨大性
一般表现在叶大;茎粗;花大,色浓;果实、种子、细胞、气孔、花粉都大。
如三倍体、四倍体葡萄粒大;四倍体萝卜主根粗大。育性低
对于水果来说,无籽或少籽为优良性状。
抗逆性强
多倍体新陈代谢旺盛,适应环境能力强。表现为抗病、抗旱、耐寒,分布广。
如多倍体从赤道到极地都有分布;高山上多倍体多;在炎热夏季的稻田里常发现多倍体花粉粒。营养成分高
碳水化合物、蛋白质、维生素、植物碱等表现偏高。
如四倍体番茄Vc含量比二倍体高一倍。四倍体紫罗兰、桂竹香芳香性强、蜜腺多。植物染色体压片法的原理
植物根尖的的分生细胞的有丝分裂,每天都有分裂高峰时间,此时把根尖固定,经过染色和压片,再置放在显微镜下观察,可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。三、实验材料1.用具:显微镜,载玻片,盖玻片,培养皿,镊子,刀片,滴管,吸水纸,测微尺2.药品:0.5或2%秋水仙素溶液,1mol/L的HCl溶液,改良的石炭酸品红溶液3.材料:水仙(2n=30),洋葱(2n=16),大蒜(2n=16),人工诱发的多倍体水仙,洋葱或大蒜的根。四、实验步骤1.把水仙或洋葱根浸在0.5%-2%的秋水仙素溶液48-72小时左右,使根部膨大。2.自来水冲洗2-3次,固定。3.检查染色体的数目利用染色体根尖压片法检查染色体的数目,确定染色体是否加倍。4.对照片的制备对非加倍的材料进行染色体根尖压片,作为对照。5.镜检。
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