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酶联免疫吸附试验临界值验证的方法和意义

王智斌;谭太昌

【摘要】目的对实验室常用的酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂的临界(cut-off)值

进行验证,判断试剂盒提供的cut-off值设置是否适合.方法各验证项目,根据试剂盒

说明书及相关标准操作程序(SOP)进行检测,检测结果计算均值、标准差,并计算出

x±3sd,然后与试剂盒提供方法计算出的cut-off值进行比较,如果该项目的x±3sd

接近试剂盒提供的cut-off,则认为该项目的试剂盒提供的cut-off是适合的.结果

HBsAg,HBeAg,抗-HBs,抗-HBe,抗-HBe,抗-HBc,抗-HBc-IgM,艾滋病毒抗体(抗-

HIV),丙型肝炎病毒抗体IgG(抗-HCV-IgG),抗-TP前S1抗原(Pre-S1Ag),丙型肝炎

抗原(HCVAg)验证结果为:0.057、0.078、0.125、0.730、0.765、0.032、0.070、

0.037、0.097、0.047、0.017.结论抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc项目验证结果与

试剂盒提供的cut-off值接近,cut-off值设置是适合的;其他项目结果相差较远,cut-

off值设置是不适合的.

【期刊名称】《检验医学与临床》

【年(卷),期】2010(007)003

【总页数】2页(P224,226)

【关键词】临界值;定性试验;酶联免疫吸附试验

【作者】王智斌;谭太昌

【作者单位】四川省人民医院,成都610072;四川省人民医院,成都610072

【正文语种】中文

【中图分类】R446.61

ELISA定性试验测定结果需要报告“有反应性”与“无反应性”,报告的依据是

cut-off值(阳性判断临界值),确定合适的cut-off值,对于检测结果的判断、减少假

阳性、假阴性具有重要的意义。

1材料与方法

1.1标本非相应疾病感染的标本2000例均来源于实验室常规检测标本。

1.2仪器与试剂国产市售ELISA检测试剂盒,包括HB-sAg,HBeAg,抗-HBs,抗-

HBe,抗-HBe,抗-HBc,抗-HBc-IgM,艾滋病毒抗体(抗-HIV),丙型肝炎病毒抗体

IgG(抗-HCV-IgG),抗-TP,前S1抗原(Pre-S1Ag),丙型肝炎抗原(HCVAg)。用AT-

Ⅱ、FAME24/20全自动酶免分析仪检测。

1.3方法按照试剂盒说明书和相关SOP操作。

1.4数据处理各验证项目,根据试剂盒说明书及相关SOP进行检测,检测结果计算均

值、标准差,并计算出±3sd(抗-HBe,抗-HBc用-3sd计算)。

2结果

统计结果见表1。

表1各验证项目统计结果标准差SDx±3sd(或-3SD)项目均值x试剂盒cut-off

结论HBsAg0.00850.01630.0570.105不适合抗-HBs0.02980.03180.125

0.105适合

续表1各验证项目统计结果项目均值x标准差SDx±3sd(或-3SD)试剂盒cut-

off结论HBeAg0.01840.01970.0780.105不适合抗-HBe2.12110.4637

0.7300.655适合抗-HBc1.93610.39010.7650.547适合抗-HBc-IgM0.0087

0.00770.0320.105不适合抗-HIV0.01270.01910.0700.126不适合抗-HCV

0.00690.00990.0370.117不适合抗-TP0.01690.02680.0970.230不适合

Pre-S1Ag0.01100.01190.0470.105不适合HCVAg0.00420.00410.017

0.120不适合

3讨论

大多数免疫分析,来自感染和非感染人群的样本之间有一个检测结果的重叠区,这就

说明一个实验一般不大可能有完全的(100%)敏感性、特异性或预测值。在选择

cut-off值和报告检测结果时应该考虑敏感性、特异性或预测值。cut-off值的设

定方法一般有标准差比率、测定标本对阴性比值、以阴性对照均值±2SD或3SD、

百分位数法、双质控、ROC曲线等[1],不同的方法设定的cut-off值有一定的差异,

但都要综合考虑假阳性率和假阴性