DNA的粗提取与鉴定公开课一等奖课件省赛课获奖课件.pptxVIP

课题1

DNA的粗提取与鉴定;课题1DNA的粗提取与鉴定;3.DNA的理化性质;4.DNA的其它特性;二苯胺试剂的配制

称取1.5g二苯胺，溶于100ml冰醋酸中，再加入1.5ml浓硫酸，用棕色瓶保存。临用前，在10ml的上述溶液中再加入0.1ml体积分数为0.2%的乙醛溶液。;一)实验材料的选用;洗涤剂能溶解细胞膜，使膜崩溃，利于释放DNA;三)去除滤液中的杂质;讨论：方案二与方案三的原理有什么不同？;四)DNA的析出与鉴定;DNA析出其它办法

实验普通规定采用预冷的95％的乙醇，从理论上分析，预冷的乙醇溶液含有下列优点。一是克制核酸水解酶活性，避免DNA降解；二是减少分子运动，易于形成沉淀析出；三是低温有助于增加DNA分子柔韧性，减少断裂。此时悬浮于溶液中的DNA丝状物相对含杂质较少，如果出现的丝状物较少，能够将此混合液再放入冰箱中冷却几分钟。

DNA的纯化尚有许多其它办法。例如，添???质量分数为25％的十二烷基磺酸钠(SDS)溶液，使蛋白质变性后与DNA分开。随即，加入氯仿-异丙醇混合液（体积比为24∶1），通过离心将蛋白质及其它杂质除去,取上清液。可重复上述操作几次，直至上清液变成透明的黏稠液体。另外苯酚能够快速使蛋白质变性，克制核酸酶的活性。运用苯酚解决后，离心分层，DNA溶于上层水相，蛋白质变;性存在于酚层中，这时可用分