《基于60Coγ辐射技术创制秸秆降解真菌种质资源筛选鉴定技术规程》.pdfVIP

ICS65.150

CCSB52DB23

黑龙江省地方标准

DB23/TXXXX—XXXX

60

基于Coγ辐射技术创制秸秆降解真菌种

质资源筛选鉴定技术规程

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

黑龙江省市场监督管理局发布

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》

的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由黑龙江省农业农村厅提出。

本文件起草单位：东北农业大学、哈尔滨学院、黑龙江省农业科学院。

本文件主要起草人：胡小梅、李凤兰、董士嘉、王浩、谷春涛、高爱丽、孙以新、冯旭、

高云飞、虞琦。

DB23/TXXXX—XXXX

60

基于Coγ辐射技术创制秸秆降解真菌种质资源筛选鉴定技

术规程

1范围

60

本标准规定了基于Coγ辐射技术创制秸秆降解真菌种质资源筛选鉴定技术规程的术语

和定义、辐射处理要求、鉴定方法等。

60

本标准适用于基于Coγ辐射诱变创制秸秆降解真菌种质资源。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期

的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括

所有的修改单）适用于本文件。

GB10252钴-60辐照装置的辐射防护与安全标准

GB17568γ辐射装置设计建造和使用规范

SN/T2632微生物菌种常规保藏技术规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1菌种

面向农业废弃物秸秆降解和转化利用过程中发挥生理代谢作用的产孢丝状真菌。

60

3.2Coγ辐射

60

选择金属元素钴源（Co）的γ射线进行辐射处理，辐射装置应符合GB17568的规定，

辐射过程应符合GB10252的规定。

3.3辐射诱变

60

利用Coγ辐射使真菌遗传物质发生突变，并从突变群体中筛选出所需要的突变菌株。

4诱变材料

根据辐射目的选用秸秆降解真菌及资源作为诱变材料。

4.1培养基

PDA培养基：见附录A.1。

高粱粒培养基：见附录A.2。

Mandels-Andreotti（MA）培养基：见附录A.3。

产纤维素酶培养基：见附录A.4。

3

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产木质素酶培养基：见附录A.5。

4.2菌种活化

将冻存的菌种在PDA培养基上采用四区划线方法进行活化，待长出单菌落后，取单菌落

进行后续制备孢子悬浮液，以保证菌种纯度。

4.3孢子悬浮液

将菌种的单菌落接种至高粱粒培养基中，30℃培养至产生大量新鲜孢子，用无菌0.9%

（w/v）生理盐水洗脱并四层无菌纱布过滤除去菌丝体，在3000×g条件下离心20min收集

沉淀。将沉淀再用适量生理盐水重悬后，。利用血球计数板计算孢子浓度，并用生理盐水将

孢子浓度稀释至1×10CFU/mL～1×10CFU/mL。68

5辐射处理

5.1辐射剂量选择