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C-反响蛋白促进LDL跨内皮细胞穿胞的机制及其在动脉粥样硬化发
生中的作用
目的:动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是许多心、脑血管病的共同发病学根
,
底,其发病机制尚为了完全说明.众多AS发病学说中广受关注的是脂蛋白滞留反响学
说.
该学说认为了,低密度脂蛋白(Lowdensitylipoprotein,LDL)在血管内膜下
,(
的沉积是AS发生的始动环节.钻研发现LDL通过穿胞Transcytosis)作用进入并滞留
于血管内皮细胞(Endothelialcells,ECs)下.
,
C-反响蛋白(C-reactiveprotein,CRP)是一种重要的炎症因子与AS的发
生关系密切.CRF^否可以通过促进LDL在ECs中穿胞并促进AS发生尚不活楚.
本局部旨在钻研CRFMLDL在ECs中穿胞的影响及其相关机制以及其在AS发生
中的作用.方法:通过LDL体外穿胞模型检测穿胞抑制剂、活性氧(Reactiveoxygen
species,ROS)相关抑制剂以及蛋白激酶抑制剂对CRF^I起的LDL穿胞的影响;不连
续密度梯度超速离心法提取脂筏检测CRFM胞吞相关蛋白
(也
(Caveolin-1、Cavin-1、Dynamin-2)及胞吐相关蛋白NSF、-SNAR
VAMP3/Cellubrevin、Syntaxin4)表达的影响;DCF(Dichlorofluorescein)荧光法检测
CRFM细胞内RO眺成的影响;ELISA法检测CRFM蛋白激酶C(ProteinkinaseC,
PKC利Src激酶活性的影响;激光共聚焦成像打量ECs对LDL的内吞摄取及LDL
,
在人脐静脉血管壁的滞留情况;在ApoE-/-小鼠AS模型中通过油红O染色打量主动
,
脉根部的脂质沉积情况免疫组化检测斑块中早期AS标志分子CD154B勺表达改变.
结果:通过LDL体外穿胞模型发现,CRP能够明显促进LDL跨内皮细胞穿胞,
穿胞抑制剂N-ethylmaleimide(NEM利Methyl-6-cyclodextrin(M0CD卜ROS生成
抑制剂Diphenyleneiodonium(DPI)、筑基保护剂Dithiothreitol(DTT)、
PKCW制剂BisindolylmaleimideI(BIMI)和Src激酶抑制剂PP2会明显抑制CR可起
的LDL穿胞;CRFW以促进脂筏中穿胞相关分子(Caveolin-1、Cavin-1、Dynamin-2、
NSF也-SNAPVAMP3/Cellubrevin、Syntaxin4)表达,并可被上述抑制剂不同程度抑
制;同时发现,外源性ROS(H2O2)也能促进LDL跨内皮细胞穿胞.DCF%检测发现CR
阿以促进内皮细胞产生ROS,DPI和DTT能拮抗CRP勺促ROST生作用.
ELISA方法检测发现CR弛上调PK兽日Src活性;激光共聚焦检测发现,穿胞抑
制剂M0CDNEM,ROSffi关抑制剂DPI、DTTW激酶抑制剂BIMI、PP2均能不同程
度减少CRP引起的促ECs摄取LDL颗粒及促LDL在血管内皮下的
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