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miR-199a在大鼠脑缺血耐受过程中的表达和作用的
开题报告
一、研究背景和意义
缺血性脑卒中是严重的脑血管疾病，其病理生理机制复杂，常常导
致患者死亡或致残。目前，脑保护剂的研究和开发成为缓解脑卒中损伤
的有效手段之一。越来越多的研究表明，microRNA(miRNA)在缺血性脑
损伤发生和恢复过程中发挥着重要的调控作用。其中，miR-199a在脑卒
中发生的过程中表达水平明显升高。然而，其作用机制还不明确。因此，
对miR-199a在脑缺血耐受中的作用进行探究，有助于揭示脑卒中的发病
机制和提高相应的治疗效果。
二、研究内容和方法
本研究旨在探究miR-199a在大鼠脑缺血耐受过程中的表达和作用。
具体方法如下：
1.大鼠脑缺血模型的建立。选取成年雄性SD大鼠，麻醉后在中线
切口处开颅，暴露出大脑血管供血区。使用血管夹将大脑中动脉夹住并
用热切割切断，再于颈部将胸锁乳突肌分离，缝合伤口并单独饲养。
2.miR-199a的测定。将大鼠脑组织分离、裂解并提取总RNA。然后
进行miR-199a的检测，采用实时荧光定量PCR技术。
3.细胞培养和细胞转染。选择原代培养的大脑神经元，采用
MirVana™miRNAMimic（AppliedBiosystems）进行细胞转染，再进行
细胞增殖、凋亡等指标的检测。
4.Westernblotting。采用Westernblotting检测miR-199a对相关
信号通路和蛋白质的调节作用。
三、预期结果
预计通过上述实验，可以得到以下结果：
1.miR-199a在缺血性脑卒中发生的过程中表达水平显著升高。
2.miR-199a对大脑神经元的增殖和凋亡具有明显的调控作用。
3.miR-199a通过调节特定的信号通路和蛋白质的表达，从而发挥其
相应的功能。
四、前瞻性分析
本研究将有助于深入探究miR-199a在缺血性脑卒中中的作用机制，
为相关脑卒中治疗方法的发展提供科学依据。此外，研究结果也有望为
其他相关疾病的发病机理研究提供新的思路和方法。
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