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ICS65.020.20B31
DB34
安徽省地方标准DB34/T1137—2010
草莓脱毒种苗繁育技术规程
TechnicalProceduresofStrawberryVirus-freePlantletsPropagation
2010-04-12发布2010-05-12实施
安徽省质量技术监督局发布
I
DB34/T1137—2010
前言
本部分按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。
本标准由安徽省农业科学院园艺研究所提出,安徽省农业委员会归口。
本标准由安徽省农业科学院园艺研究所、长丰县农业技术推广中心起草。本标准主要起草人:董玲、贺雷风、廖华俊、江芹、冯宗友、李必芝。
本标准为首次发布。
1
DB34/T1137—2010
草莓脱毒种苗繁育技术规程
1范围
本规程规定了草莓脱毒种苗繁育技术的术语和定义、草莓脱毒原原种苗的生产、草莓脱毒原种苗的繁育、草莓脱毒生产种苗的繁育和病虫害防治的要求。
本规程适于安徽省草莓脱毒种苗的繁育,其它同类草莓产区亦可参考。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T8321农药合理使用准则
NY/T406脱毒草莓种苗病毒检测技术规程
NY/T496肥料合理使用准则通则
NY5104无公害食品草莓产地环境条件NY5105无公害食品草莓生产技术规程
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。3.1
外植体
指由活植物体上切取下来用于组织培养的组织或器官。3.2
脱毒原原种苗
利用组织培养等途径获得的试管苗,经检测确认不携带规定检测病毒且移栽成活后的植株。用于繁育原种苗。
3.3
脱毒原种苗
指用脱毒原原种苗,在隔离网条件下繁殖出的第一代苗。此过程也可以省去,用脱毒原原种苗直接在自然隔离的条件下生产脱毒生产种苗。
3.4
2
DB34/T1137—2010脱毒生产种苗
指用脱毒原种(或原原种)苗,在自然隔离条件下繁殖出的直接用于大田生产的种苗。
4草莓脱毒原原种苗的生产
4.1品种选择
根据当地栽培方式和市场需求选择品种。促成或半促成早熟栽培选择休眠浅的品种,露地栽培选择休眠深的品种。
4.2草莓脱毒方法
主要采用匍匐茎茎尖组织培养与物理方法相结合进行。
4.2.1茎尖组织培养
4.2.1.1培养基配置灭菌
使用MS基本培养基配方附加不同种类和数量的激素,pH值5.8~6.0。将制备好的培养基溶液分装于培养瓶,每瓶10ml~15ml,用硫酸纸、铝箔或耐高温塑膜扎紧,在1.2kgf/cm高压锅中消毒15min~20min,冷却后备用。
4.2.1.2采集外植体
采样最佳时间为3月~5月份晴天的上午,选择无病虫、品种纯正的健壮植株,切取带生长点的匍匐茎段2cm~3cm,流水冲洗1h~2h。
4.2.1.3剥取茎尖组织
将表面清洗过的外植体置于超净工作台上,用70%乙醇表面消毒数秒后,用1.0%次氯酸钠消毒10min~30min或0.1%升汞消毒8min~10min分钟,之后用无菌水冲洗3~5次后接种。在无菌接种箱中的解剖镜下用解剖刀挑取0.2mm~0.3mm的茎尖,接种于茎尖诱导培养基(MS+6-BA0.5~1.0mg/L+NAA0.1mg/L)中进行培养,每瓶接种一个茎尖。
4.2.1.4培养条件
温度23℃~25℃,光照强度2000lx~3000lx,每天照光14h~16h。
4.2.2病毒检测
4.2.2.1检测病毒种类
主要四种病毒:草莓斑驳病毒(SMOV)、草莓轻型黄边病毒(SMYEV)、草莓镶脉病毒(SVBV)、草莓皱缩病毒(SCV)。
4.2.2.2病毒检测方法
病毒检测有指示植物小叶嫁接检测法、电子显微镜检测法、血清免疫检测法。在生产中建议使用指示植物小叶嫁接检测法。
4.2.2.3指示植物小叶嫁接检测法
3
DB34/T1137—2010
指示植物选用草莓EMC、UC5、UC10等,具体检测方法按NY/T406执行。
4.2.3去除带病毒株系
检测前先对茎尖脱毒组织培养试管苗进行株系标记,再进行病毒检测,根据检测结果确定无病毒株系和病毒株系,再根据标记淘汰病毒株系试管苗
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