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探讨乳腺癌干细胞的表型特征和生物学特

性-肿瘤学论文-临床医学论文-医学论文

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乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤，也是女性病死率最高的肿瘤，占

女性恶性肿瘤人数的14%。乳腺癌干细胞的存在使乳腺癌难以治愈。

乳腺癌干细胞除具有癌细胞的特征外，还具有普通干细胞所具有的特

征，如自我更新、多向分化、增生潜能等，并且具有高致瘤性、转移

性、耐药性等特点。因此，探讨乳腺癌干细胞的表型特征和生物学特

性，在此基础上建立针对乳腺癌干细胞的治疗技术和策略，对乳腺癌

的治疗具有重要意义。

1乳腺癌干细胞的表面分子标记

不同的肿瘤干细胞具有不同的表面分子标记，根据这些表面分子

标记可以进行肿瘤干细胞的分选。乳腺癌干细胞的主要表面分子标记

如下。

1．1CD44+CD24－/lowCD44+CD24－/low是目前乳腺癌干细

胞公认的表面标记分子。2003年Al-Hajj等用流式细胞仪首次从乳

腺组织中分离出具有该特殊表面标志的细胞，将100个CD44+CD24

－/low细胞注入非肥胖型糖尿病/严重联合免疫缺小鼠(nonobese

diabetic/severecombinedimmu-nodeficient，NOD/SCID)体内，即可

生成肿瘤。将小鼠体内生成的这些肿瘤细胞分离后再接种到小鼠脂

肪垫中，发现仍然可继续成瘤，其致瘤活性增加10～50倍。生成

的肿瘤细胞经分离传代，发现其自我更新能力及成瘤能力均不变，而

且新生成的肿瘤细胞与原发灶中细胞表型一致，同时也含有其他混合

表型的非致瘤细胞。这充分表明含有CD44+CD24－/low表型的乳腺

癌细胞具有肿瘤干细胞特征。

1．2CD133+2008年，Wright等分离出CD133+细胞，将50～

100个CD133+细胞接种于NOD/SCID小鼠体内，可快速生成肿瘤。

然而，将经过不断传代的这群细胞接种于NOD/SCID小鼠体内，发现

随着传代次数的增加，其在NOD/SCID小鼠体内肿瘤形成率及生长

速度均降低。这是关于CD133+作为乳腺癌干细胞表面标记分子的首

次报道。

1．3CD55+有研究者利用流式细胞术从人乳腺癌细胞系MCF-7

中分离出CD55high细胞和CD55low细胞，发现CD55high细胞具有

更高的克隆形成效率、更强的凋亡抵抗性及一定的分化能力，因此推

测CD55可能是乳腺癌干细胞一种新的表面标志，但还需体内成瘤实

验验证其可靠性。

1．4整合素6(integrin-6，ITG6)Pontier等从人类乳腺癌细胞

MCF-7中分离出ITG6过表达的细胞亚群，注入1000个该细胞于

免疫缺陷小鼠体内即可使小鼠生成肿瘤，并且具有很强的自我更新能

力。而沉默ITG6基因后，肿瘤生长速度明显缓慢。提示ITG6可作

为识别该亚群乳腺癌干细胞的标志。

1．5CD29highCD61+CD29和CD61是与细胞生长相关的两种表

面蛋白。CD29low在未分化成熟的乳腺上皮细胞CD24+中占管腔的大

部分，CD29highCD24+可作为乳腺癌干细胞。有研究将CD29lowCD24+

未分化成熟的乳腺上皮细胞分为CD61+干细胞和CD61－成熟细胞

两个亚群。在MMTV-Wnt1乳腺癌的小鼠模型中，CD61+乳腺癌干细

胞的成瘤能力远远高于CD61－细胞的成瘤能力。

2乳腺癌干细胞的分离

分离乳腺癌干细胞是探讨乳腺癌干细胞特性的重要切入点，目前

分离乳腺癌干细胞最常用的方法有如下几种。

2．1利用细胞表面分子标记分选来源于不同组织及种系的肿

瘤细胞具有不同的肿瘤干细胞表面分子标记，其原理是用荧光标记的

抗体孵育细胞，抗体特异性结合到表型标记后，在流式细胞仪系统检

测下将标有荧光的细胞分选出来。Croker等应用此法从人乳腺癌细胞

系MDA-MB-435、MDA-MB-231、MDA-MB-468及MCF-7中分离出

具有CD44+CD24－/low表型的乳腺癌干细胞。由于该方法具有较高

的特异性，多数学者现已选用该法分选乳腺癌干细胞。

2．2染料外排法分选肿瘤干细胞中特有ATP结合转运蛋白

2(ABCG2