维生素含量测定方法.ppt

维生素C2,6-二氯酚靛酚维生素C2,6-二氯酚靛酚（还原型）（氧化型，粉红色）（氧化型）（还原型）++====2,6-二氯酚靛酚染料的钠盐在水溶液中显蓝色，在酸性溶液中呈红色，被还原后红色消失。第18页,共23页，星期六，2024年，5月2高效液相色谱法测定维生素C原理样品中的维生素C经乙二酸溶液（1g/L）迅速提取后，在反相色谱柱上分离测定。主要仪器及试剂高效液相色谱仪，紫外检测器等。乙二酸溶液（1g/L）。维生素C标准溶液：准确称取维生素C样本2mg与50ml容量瓶中，用乙二醇溶液（1g/L）溶解、定容，摇匀备用，用前配制。第19页,共23页，星期六，2024年，5月2高效液相色谱法测定维生素C样品处理液体样品：取原液5mL与25mL容量瓶中，用乙二醇溶液（1g/L）定容，摇匀后经0.45μm滤膜过滤后待测。固体样本：称1g样品于研钵中，用5mL乙二醇溶液（1g/L）迅速研磨，过滤，残渣用乙二醇溶液（1g/L）洗涤，合并提取液于25mL容量瓶中，蒸馏水定容，摇匀后经0.45μm滤膜过滤后待测。第20页,共23页，星期六，2024年，5月2高效液相色谱法测定维生素C测定取5μm标准溶液进行色谱分析，重复进样3次，取标样峰面积的平均值。然后在相同条件下，取5μL样品液进行分析，以相应峰面积计算含量。色谱条件色谱柱，μ-BondapakC18（直径3.9mm*300mm）；流动相，H2C2O4（1g/L）；流速，1.0mL/min；检测器，紫外245nm；进样量，5μL。第21页,共23页，星期六，2024年，5月2高效液相色谱法测定维生素C计算结果式中：X―样品中维生素C的含量，mg/100g或mg/100mL；m1―标样进样体积中维生素C含量，μg；m2―样品质量（或体积），g或mL；A1―标样峰面积平均值；A2―样品峰面积；V1―样品进样量，μL；V2―样品定容体积，mL。第22页,共23页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第23页,共23页，星期六，2024年，5月关于维生素含量测定方法摘要目前研究维生素C测定方法的报道较多，如滴定法、光度分析法、高效液相色谱法等，各种方法各有特点。特别是高效液相色谱法是近年来发展较快的一种方法。第2页,共23页，星期六，2024年，5月关键词维生素C滴定法高效液相色谱法第3页,共23页，星期六，2024年，5月概述维生素C是可溶于水的无色结晶，是一种分子结构最简单的维生素。维生素C有防治坏血病的功能，所以在医药上常把它叫做抗坏血酸。维生素C能保持巯基酶的活性和谷胱甘肽的还原状态，起解毒作用等。其广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑橘等食品中含量尤为丰富。准确测定维生素C的含量，对饮食健康、医疗保健都具有十分重要的意义。第4页,共23页，星期六，2024年，5月测定维生素C常用的方法有2,6-二氯靛酚滴定法、苯肼比色法、荧光法及高效液相色谱法等。2,6-二氯靛酚滴定法测定的是还原型抗坏血酸，该法简便，也较灵敏，但特异性差，样品中的其他还原性物质会干扰测定，使测定值偏高，且对深色样液滴定终点不易辨别。苯肼比色法和荧光法测得的都是抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。高效液相色谱法可以同时测得抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的含量，具有干扰少、准确度高、重现性好、灵敏、简便、快速等优点，是上述几种方法中最先进、最可靠的方法。第5页,共23页，星期六，2024年，5月维生素C的结构式维生素C：六碳的多羟基内酯第6页,共23页，星期六，2024年，5月测定方法滴定法测定维生素C高效液相色谱法测定维生素C第7页,共23页，星期六，2024年，5月原理染料2,6-二氯靛酚在酸性溶液中呈粉红色（在中性或碱性溶液中呈蓝色），被还原型抗坏血酸还原后颜色消失。还原型抗坏血酸还原染料后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准染料液的量，与样品中还原型抗坏血酸含量成正比。1滴定法测定维生素C2，6一二氯靛酚法第8页,共23页，星期六，2024年，5月

2，6一二氯靛酚法试剂1%的乙二酸溶液，