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关于结核菌素及结核菌素试验结核菌素
结核菌素简称结素,是由结核杆菌滤液制成的一种试剂,即用人型结核杆菌培养后加热杀死结核菌所提炼的浓缩液,不含任何死菌或活菌,在临床和结核病流行病学调查中广泛应用。第2页,共20页,星期六,2024年,5月一、目前我国常用的结核菌素种类1、旧结核菌素(OldTuberculinOT):是从生长过结核菌的液体培养基中提炼出来的结核菌代谢产物.它由结核菌的菌体全部和培养基等成分构成,主要有:(1)菌体蛋白、多糖、核酸、脂类;(2)菌体代谢产物;(3)培养基成分。试验中易产生非特异性反应。80年代前使用,现在已不用。第3页,共20页,星期六,2024年,5月2、结核菌素纯蛋白衍生物(PPD):结核菌纯蛋白衍生物,它是将旧结素过滤后,再用硫酸铵等加以沉淀而获得的纯度较高的结核杆菌分泌蛋白质。其制作过程:菌株→培养→灭菌、滤过→浓缩→盐析、脱盐→干燥、保存→分装。我国从人型结核菌制成PPD(PPD-C),又从卡介苗制成卡介菌纯蛋白衍生物(BCG-PPD),0.1ml为5IU用于临床诊断。应用中特异性反应更加敏感和准确,90年代后至今一直在使用。第4页,共20页,星期六,2024年,5月二、结核菌素试验方法(一)、试验方法分类皮上划痕法(Pirquet)软膏粘贴法(Moro)皮上多刺法(Heaf)皮内注射法(C.Mantoux第5页,共20页,星期六,2024年,5月(二)、皮内注射的部位和方法选择1ml一次性注射器,在左前臂掌侧前1/3中央皮肤处,用75%的酒精消毒,注射时绷紧皮肤,针管平放,注射器刻度和针孔斜面一致向上,浅浅地与皮肤平行刺入皮内,不见针孔即可,将0.1mlPPD缓慢注入皮内,剂量准确时,局部可出现直径6-8mm大小的橘皮样皮丘。不能把皮丘的大小作为衡量剂量的指标(注意:在注射前应询问患者以前曾否做过该试验,如做过应问清时间、部位,以免引起促进反应。同时了解是否存在接种禁忌症。)第6页,共20页,星期六,2024年,5月三.结素试验禁忌症:a.患有重症或热性疾病,体温超过37.5度,及各种传染病的恢复期,结素试验可能发生不良反应,使其病情加重。b.有器质性疾病如:心血管、肾脏病、胃肠病的急性期。C.有过敏反应史、特别是预防注射过敏史和免疫缺陷的人员。d.明显营养不良,体弱和严重衰弱者。e.正在使用激素等免疫抑制剂治疗者。f.在既往结素试验中出现水泡、坏死等非常强烈反应者。g.患有弥漫性皮肤病者或注射部位有皮肤病。家族皮肤病史。h.有癫痫、癔病等神经系统疾病。第7页,共20页,星期六,2024年,5月第8页,共20页,星期六,2024年,5月四.结果观察试验结果需在皮试后48—96小时观察,我国通常规定在皮试后72小时为观测反应时间,测量时以硬结(横径+纵径/2)大小为主,不以红晕大小作为判断标准。因为硬结为特异性变态反应,而红晕为非特异性反应。有的情况下硬结和红晕大小一致。反应大小以mm记录,不应记录为+、-号。第9页,共20页,星期六,2024年,5月硬结示意图
平均直径=横径+纵径/2第10页,共20页,星期六,2024年,5月五.结素反应结果分类:1)阴性反应:注射部位无硬结或硬结平均直径<5mm.2)阳性反应:硬结平均直径≥5mm___阳性5-9mm___一般阳性10-19mm___中度阳性≥20mm(5岁以下儿童≥15mm)___强阳性反应≤20mm,但是出现水泡、溃疡、坏死或淋巴管炎--强阳性阳性和阴性之间不可能有精确的科学分界。但是一般反应越强则结核菌感染的可能性越大,但皮试阳性并不意味着就是结核病人。第11页,共20页,星期六,2024年,5月六.影响结素反应强度的因素1.结素试验的假阴性反应a.机体处于变态反应前期感染后3-8周,机体没有形成免疫b.重症或进展期的结核病:传递免疫作用的致敏淋巴细胞减少。结脑粟粒干酪性肺炎c.有HIV感染、AIDS、麻疹、猩红热、腮腺炎等急性传染病免疫机制受到抑制,结素阴性d.某些疾病:白血病、结节病、癌症等,免疫系统受干扰,结素可阴性e.药物因素:应用免疫抑制剂,如激素等结素可阴性f.其他因素:老年、营养不良、高烧等均能使结素反应成阴性g.技术因素:结素效价低、注射剂量不足、判断和记录错误h.非典型抗酸杆菌感染:约占结素阴性病人的50%。第12页,共20页,星期六,2024年,5月2.结素试验的假阳性a.非典型分支杆菌感染对结素试验有交叉反应
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