《离心分离技术》课件.pptVIP

完整版ppt*连续推送式连续锥形滤网连续式完整版ppt*GT6H13卧式离心过滤机本机适宜过滤果汁或皮汁,达到液—固体分离,提高汁的纯度。自动连续卸料离心过滤机为(锥形转鼓)完整版ppt*基本参数选择 颗粒d,固液?差,? 基本型号固体物浓度 亚型 产物热稳定性 低温离心 流量Q,规模 规格、台数 气溶胶,活cell密封灭菌设计§4.3离心机的选用（P66）离心机的选择包含体产物分离工艺（牛生长激素分离提取）§4.4离心机在生物工业中的应用（P67）完整版ppt*§4.5超离心法超离心法:根据物质的沉降系数、质量和形状不同，应用强大的离心力，将混合物中各组分分离、浓缩、提纯的方法。完整版ppt*一、超离心技术的原理在某种介质中，使一种球形粒子从液体的弯月面沉降到离心管某部(如底部)所需的时间:当粒子直径和密度不同,移动同样距离所需的时间不同,在同样的沉降时间,其沉降位置也不同.式中t为沉降时间,μ为悬浮介质的粘度,d为粒子直径,ρs为粒子密度,ρ为介质密度；r1为旋转轴中心到液体弯月面的距离,r2为从旋转轴中心到离心管底部的距离。完整版ppt*利用它可以从组织匀浆中分离细胞器,其主要细胞成分的沉降顺序,一般先是整细胞和细胞碎片,然后是核、叶绿体、线粒体、溶酶体、微粒体和核蛋白体。完整版ppt*二、超离心技术的分类差速离心（一）制备性超离心（二）分析性超离心等密度离心一般密度梯度离心法密度梯度离心完整版ppt*采用不同的离心速度和离心时间,使沉降速度不同的颗粒在不同的离心速度及不同离心时间下分批分离的方法。主要用于分离大小和密度差异较大的颗粒。（一）制备性超离心1.差速离心(Differentialcentrifugation)完整版ppt*优点:操作简单，离心后用倾倒法即可将上清夜与沉淀分开，并可使用容量较大的角式转子。缺点:①分离效果差；②壁效应严重；③颗粒被挤压。完整版ppt*完整版ppt*2.密度梯度区带离心法密度区带离心法是样品在一定惰性梯度介质中进行离心沉淀或沉降平衡,在一定离心力下把颗粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同区带的分离方法。密度梯度系统:梯度介质有足够大的溶解度，不与分离组分反应，不会引起分离组分的凝集、变性或失活。样品铺在密度梯度溶液表面，离心后形成若干条界面清楚的不连续区带。完整版ppt*优点:①分离效果好，可一次获得较纯颗粒；②适应范围广，既能分离具有沉淀系数差的颗粒，又能分离有一定浮力密度的颗粒；③颗粒不会积压变形，能保持颗粒活性，并防止已形成的区带由于对流而引起混合。缺点:①离心时间较长；②需要制备梯度；③操作严格，不宜掌握。完整版ppt*（1）一般密度梯度离心法差速区带离心法（动态法或沉降速度法）（Diensitygradientcentrifugation）根据分离的粒子在梯度液中沉降速度的不同,使具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内分成一系列区带,达到彼此分离的目的。完整版ppt*离心过程中区带的位置、形状随离心时间而改变用于分离有一定沉降系数差的颗粒,与密度无关把样品铺放在一个连续的液体密度梯度上,然后进行离心,并控制离心分离的时间,使得粒子完全沉降之前,在液体梯度中移动而形成不连续分离区带。该法仅用于分离有一定沉降系数差的粒子,与粒子密度无关。因此大小相同,密度不同的粒子(如线粒体、溶酶体和过氧物酶体)不能用此法分离。这种方法已用于RNA—DNA混合物、核蛋白体亚单位和其他细胞成分的分离。完整版ppt*完整版ppt*完整版ppt*（2）等密度离心

（Isopycniccentrifugation）指当不同颗粒存在浮力密度差时,在离心力作用下,颗粒或向下沉降或向上浮起,一直沿