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微生物的生长与环境条件微生物的生长与环境条件

本章主要内容纯培养微生物的生长。微生物的个体生长和分化。环境条件对微生物生长的影响。微生物的生长与环境条件

一、纯培养微生物的生长微生物的生长与环境条件

相关概念生长：是细胞体积、内含物和细胞数目的增加，对单细胞微生物而言，是指细胞内的原生质和各种细胞结构协调增加。繁殖：产生新一代的过程。对单细胞微生物而言，细胞分裂导致细胞数目的增加也是繁殖。纯培养：从一个细胞繁殖得到的后代称为繁殖。微生物的生长与环境条件

获得纯培养的方法稀释分离法稀释平皿分离法平皿划线分离法单细胞挑取法利用选择性培养基分离（一般还要经过划线分离法进行纯化）通过控制某些环境因素纯化菌种微生物的生长与环境条件

微生物的生长与环境条件

图7-2平皿划线分离法

A.扇形划线;B.连续划线;C.方格划线微生物的生长与环境条件

方法应用范围液体稀释法适用与培养细胞较大的微生物固体稀释平皿法即可定义,有可定量,用途广泛平皿划线分离和涂布分离法方法简便,多用于分离细菌组织分离法高等真菌及植物病原菌单细胞挑取法局限于高等专业化的科学研究利用选择培养基法适用于分离某些生理类型较特殊的微生物表7-1微生物纯培养分离方法的比较微生物的生长与环境条件

细菌群体生长的测量细胞数量的测定细胞总数的测定。活细菌数量的测定细胞生物量的测定测定细胞干重法DNA含量测定法ATP含量测定法代谢活性法微生物的生长与环境条件

细胞总数的测定（totalcount)显微镜直接计数法：适用于细菌等单细胞微生物群体比浊法：原理是悬浮液中细胞数量越多，浊度越大，在一定浓度范围内，悬液中的细菌细胞浓度与光密度成正比，与透光度成反比。微生物的生长与环境条件

用Petroff-Hausser计数器直接计数微生物的生长与环境条件

活细菌数量的测定（viablecount)稀释平皿测数法。最大概率法（mostprobablenumber,MPN)浓缩法（滤膜法）。微生物的生长与环境条件

稀释平板计数法微生物的生长与环境条件

最大或然数法微生物的生长与环境条件

稀释度10~-310~-410~-510~-610~-710~-8重复数555555出现生长的管数555410最大或然数法计算微生物的生长与环境条件

分批培养中细菌群体的生长细菌群体的生长曲线微生物的生长与环境条件

细菌群体的生长周期根据微生物的生长速率（growthrateconstant），即每小时的分裂代数不同，一般可以将典型生长曲线分为延滞期、指数期、稳定期和衰亡期。微生物的生长与环境条件

A延滞期(lagphase)特点：生长速率常数等于零；细胞形态变大或增长；核酸含量提高；合成代谢活跃，易产生诱导酶；对外界不良条件反应敏感。影响因素：接种龄；接种量；培养基成分微生物的生长与环境条件

B指数期(exponentialphase)特点：生长速率常数最大；细胞进行平衡生长，菌体内各成分最均匀；酶系活跃，代谢旺盛在指数 期三个最重要的参数是繁殖代数；生长速率常数；代时。影响因素：菌种；营养成分；营养物浓度；培养温度微生物的生长与环境条件

C稳定期(stationaryphase)特点：生长速率常数等于0。稳定期到来的原因：①营养物尤其是生长限制因子的耗尽；②营养物的比例失调，如C/N不合适；③酸、醇、毒素等有害代谢产物的积累；④pH、氧化还原电势等物化条件越来越不适宜。微生物的生长与环境条件

D衰亡期（declinephase）特点：整个群体出现负增长（R为负值）。原因：主要是外界的环境对继续生长越来越不利，从而引起细胞内的分解代谢大大超过合成代谢，继而导致菌体死亡。微生物的生长与环境条件

以二分裂的细菌为代表，假设细菌培养体在对数期to时的总菌数为No，那么到ｔ时的菌数Nt＝No×2n；式中ｎ为to到ｔ这段时间内细菌的繁殖代数。如果用G来表示世代时间(或倍增时间):即群体细胞数量增加一倍需要的时间，则：



------------------G＝(t-to)/n(1)

----∵------------Nt＝No×2n

----∴------------logNt＝ｎlog2＋logNo

------------------ｎ＝〔logNt－logNo〕/log2=logNt/N0/0.301(2)

将(2)代入(1)式得：

------------------G＝0.301(t-t0)/logN