小檗碱的提取和纯化.docVIP

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黄柏中小檗碱的提取和纯化

实验目的：

掌握小檗碱的提取工艺——石灰乳法；

掌握小檗碱的纯化操作——柱色谱法；

掌握小檗碱的鉴定方式——硅胶薄层色谱法；

实验原理：

小檗碱属于季铵碱，其游离型在水中的溶解度较大，而其盐酸盐在水中溶解度非常小。故利用此性质，并结合盐析法，使小檗碱以沉淀形式析出，从黄柏皮中提取出小檗碱。

实验器材：

仪器：烧杯、玻璃棒、纱布、层析柱、抽滤机、烘箱等；

材料：黄柏皮、CaO粉末、水、NaCl、浓盐酸、95%乙醇、中性氧化铝、氯仿、甲醇等；

实验内容：

渗滤：

①称取黄柏皮50g，加适量的蒸馏水至没过黄柏皮（终体积可自行调整）；

②加入质量为终体积1%调成水糊状的CaO粉末，并搅拌均匀，浸渍2h或过夜；

盐析：

①收集渗漉液(八层纱布过滤1~2遍)；

②加入渗漉液总体积20%的NaCl，搅拌均匀，放置1-2min；

③使用抽滤机抽滤(或使用离心机代替3000r/min,10min)，收集沉淀；

④将沉淀加少量水重悬，溶解于20倍体积的沸水中(总体积不宜超过100ml)，趁热过滤！

⑤滤液加浓盐酸调PH=1-2，静置5min，抽滤（或离心），80℃烘干；

柱色谱：

①称取80-100g中性氧化铝，用现配的95%乙醇调成水浆状；

②装柱：柱子底端棉花要充分小，薄薄一层即可。湿法装柱过程中避免气泡，保持柱液面水平。装完后不断补加95%乙醇，让柱子压实至柱液面不在下降；

③上样：柱液面留有少量液体（高度0.5cm左右为宜），缓慢均匀上样，避免将柱面吹散。照相备用；

④用离心管收集黄色条带，做好标记；

薄层色谱：

①配置展开剂（氯仿：甲醇的比例可尝试9：1、8：2、7：3、6：4等）；

②点样后，将硅胶薄层色谱板放到展开剂中后，待液体爬到距板前沿1-2cm时，迅速拿出标记液面线和斑点位置，记录距离数据，照相备用；

③计算比移值Rf=a/b（数值=0.15-0.75之间适合）；

实验要求：

查阅文献，可采用不同分离方法：

石灰乳法可分别使用NaOH、Ca(OH)2、CaO粉末；

醇提法

超声提取法

酸水法

运用薄层色谱进行鉴定，可采用不同的展开剂及配比进行样品分离，通过调整展开剂极性，实现样品的良好分离，观察并比较展开效果，计算比移值。简述展开效果不同的理由；

各组不同方法之间进行比较、分析和讨论，找出过程分离的差异及优缺点；

按照研究论文格式写一份研究报告，内容包括：中英文摘要、前言、实验材料和方法、实验结果与讨论、结论。重点是讨论部分，与其他组结果进行比较和分析，最后得出结论

思考题：

简述从黄柏皮中提取小檗碱是利用了它自身的什么性质实现的；

简述石灰乳法提取小檗碱时，加入NaOH、Ca(OH)2、CaO目的，以及不同分离方法的差异；

阐述提取分离过程中加NaCl起什么作用；