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重组人IL-2大肠杆菌工程菌质粒稳定性的研究

重组人IL-2大肠杆菌工程菌质粒稳定性的研究

摘要

基因工程菌中质粒稳定性对于基因工程菌的发酵有着重要影响，但基因工程菌在传

代中经常出现质粒不稳定遗传的现象。本试验通过在工程菌的培养过程中添加抗生素这

一选择压力和诱导表达目的蛋白的方式来提高基因工程菌的稳定性，并通过双酶切电泳

分析及高效率的诱导表达外源蛋白来进行检测，得出工程菌在LB（-）和LB（+）平板

上都能生长且形态相似；电泳图平行、酶切片段的位置大致一致；诱导表达的外源基因

的质粒稳定。提高质粒稳定性有利于外源蛋白表达，以满足大规模生产发酵。

关键词：基因工程菌；质粒；稳定性

-I-

重组人IL-2大肠杆菌工程菌质粒稳定性的研究

Studyonthestabilityofplasmidofrecombinant

humanIL-2E.colibacteria

Abstract

Escherichiacoli.plasmidstabilityforthegeneticengineeringofbacteriafermentation

hasimportantimplicationsgeneticallyengineeredbacteriainthemid-recurringgenetic

optionofantibioticpressureandproteinexpressioninducedbywayofreferencehigh

LB(+),andthemorphologyissimilar;Theelectrophoregramisparallel,andthepositionof

thefragmentisconsistenctroughly;Inducibleexpressionofforeigngenesisstabile.We

Keywords:Geneticengineering;plasmid;stability

-II-

重组人IL-2大肠杆菌工程菌质粒稳定性的研究

目录

摘要

ABSTRACTII

前言

1材料与方法.

1.1试验材料

1.1.1菌种质粒

1.1.2培养基

1.1.3常用药品

1.1.4试验仪器

1.2试验方法

1.2.1基因工程菌的转化

1.2.2制平板

1.2.3连续传代

1.2.4鉴定.

2结果与分析.

2.1不同代菌的传代结果

2.2上述不同代质粒的电泳图

2.3不同代质粒的酶切图

2.4诱导表达不同代的基因工程菌的外源基因蛋白电泳图.

3讨论11

3.1分析本试验所出现的问题11

3.2质粒稳定性影响的若干因素

3.2.1含调控型启动子的基因工程菌稳定性控制

3.2.2选择性培养基提高质粒稳定性

3.2.3培养操作方式对工程菌稳定性的影响

3.2.4培养条件对工程菌稳定性的影响

4结论

参考文献.

致谢

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