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B43
DB65
新疆维吾尔自治区地方标准
DB65/T4093一－2018
应用母体外周血中游离DNA鉴定绵羊早期
胎儿性别技术规程
Technicalspecificationofidentifyingthesheep’searlyfetalsexbyapplyingfree
DNAfrommaternalperipheralblood
2018-1-25发布2018-2-25实施
新疆维吾尔自治区质量技术监督局发布
DB65/T4093-2018
目lj吕
本标准根据GB/Tl.1一2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》的要求编写。
本标准由新疆维吾尔自治区畜牧厅提出。
本标准由新疆维吾尔自治区畜牧厅归口。
本标准由新疆畜牧科学院畜牧研究所和新疆农业大学负责起草。
本标准主要起草人：田可川、黄锡霞、赵冰茹、何军敏、吴伟伟、田月珍、王旭光、徐新明、付雪
峰、哈尼克孜－吐拉甫、阿布来提·苏来曼、陈华峰、朱桦、曾伟丹。
I
0865/T4093-2018
应用母体外周血中游离DNA鉴定绵羊早期胎儿性别技术规程
1范围
本标准规定了应用母体外周血游离DNA鉴定细毛羊胎儿性别技术要点及其操作规范。
本标准适用于应用母体外周血游离DNA鉴定细毛羊胎儿性别。
2术语及定义
下列术语和定义适用于本文件。
2.1
外周血中游离DNAFreeDNAinperipheralblood
外周血中游离的DNA主要是指存在于血浆及血清等循环系统里的一些小片段DNA。
2.2
性别鉴定Genderidentification
在胎儿出生前，利用医学、生物学和遗传学的理论和技术，借助DNA染色体检测技术，结合荧光
定量PCR技术，检测母血中是否含有胎儿Y染色体，以确定胎儿性别。
2.3
SRY基因SRYgene
雄性的性别决定基因，指Y染色体上具体决定生物雄性性别的基因片段。
2.4
巢式PCR反应NestedPCR
巢式PCR是一种变异的聚合酶链式反应CPCR），使用两对（而非一对）PCR引物扩增完整的片段。
第一对PCR引物扩增片段和普通PCR相似。第二对引物称为巢式引物（第一次PCR扩增片段内部）结合
在第一次PCR产物内部，使得第二次PCR扩增片段短于第一次扩增。
2.5
PCR扩增PolymeraseChainReaction
聚合酶链式反应简称PCR(PolymeraseChainReaction），又称：多聚酶链式反应。PCR是体外酶促
合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火（复性）及适温延伸等反应组成一个周期，循
环进行，使目的DNA得以迅速扩增，具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。
3材料与方法
0865/T4093-2018
3.1材料
选取娃报时期3周～10周的绵羊。每只绵羊颈静脉采血量为3mL～5mL,EDTA或肝素纳Cl%)
等抗凝，采血后，颠倒混匀防止血液凝固；非抗凝管采血量为3mL～5mL；并于采血后2h内进行血浆
和血清的分离，冷冻保存。抽取1例健康公羊血液作为阳性对照，抽取
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