皮肤真菌检查技术.ppt

（二）检验方法：1．直接镜检：直接采取病变部位的标本，用显微镜检查有无菌丝及孢子的存在，本法迅速简便，是临床真菌检查最常用的方法第32页,共59页，星期六，2024年，5月2．分离培养：取毛发、皮屑、甲屑等标本，用70％乙醇消毒，接种沙保氏琼脂斜面培养基，25℃培养7～14天，根据菌落形态及颜色、并挑取菌落镜检菌丝及孢子的特征进行鉴定。第33页,共59页，星期六，2024年，5月毛癣菌属第34页,共59页，星期六，2024年，5月小孢子菌属第35页,共59页，星期六，2024年，5月表皮癣菌属第36页,共59页，星期六，2024年，5月3．荧光检查：本法主要用于头癣检查。病发在滤过紫外灯照射下可发出不同色泽的荧光，如黄癣菌病发呈暗绿色荧光，白癣小孢子菌属的病发呈亮绿色荧光等。第37页,共59页，星期六，2024年，5月第三部分深部感染真菌深部真菌是侵犯皮下组织和内脏，引起全身性感染的真菌。多数能引起慢性肉芽肿样炎症、溃疡及坏死等病变第38页,共59页，星期六，2024年，5月深部感染真菌分两大类：1.致病性真菌：此类真菌在正常人体内部不存在，一旦侵入机体，即可致病，如组织胞浆菌、球孢子菌、芽生菌等，属外源性，我国少见；2.条件致病性真菌：是人体正常菌群的成员，当机体抵抗力下降时才致病，如新型隐球菌、白色念珠菌、曲霉菌和毛霉菌等。第39页,共59页，星期六，2024年，5月一、白色念珠菌白色念珠菌（canidiaAlbicans）又称白色假丝酵母菌，广泛存在于自然界，也存在于正常人口腔，上呼吸道，肠道及阴道，一般在正常机体中数量少，不引起疾病。为条件致病性真菌。第40页,共59页，星期六，2024年，5月（一）生物学特性卵圆形，大小2μm×4μm，革兰氏染色阳性。有假菌丝。第41页,共59页，星期六，2024年，5月培养特性：典型类酵母型菌落，表面光滑，呈灰白色或奶油色，有酵母气味。涂片镜检，可看到表层为卵圆形芽生细胞，底层有较多假菌丝。第42页,共59页，星期六，2024年，5月（二）致病性和免疫性白色念珠菌可侵犯人体许多部位，可引起：1.皮肤念珠菌病：好发于皮肤皱褶处；2.粘膜念珠菌病：鹅口疮、口角炎、阴道炎最多见。3.内脏及中枢神经念珠菌病：肺炎、肠胃炎、心内膜炎、脑膜炎、脑炎等。机体可产生一定免疫力。第43页,共59页，星期六，2024年，5月（三）检验方法及鉴定1．直接镜检：革兰氏染色镜检2．培养特点：典型的酵母菌落。第44页,共59页，星期六，2024年，5月3．鉴定试验1）芽管试验：取少许待检的白色念珠菌接种于0.5ml人或兔血清中，混匀，直37℃水浴2-3h后，取出一接种环菌液，涂片、镜检。有芽管产生者为白色念珠菌，其他念珠菌不产生芽管。第45页,共59页，星期六，2024年，5月2）TZC试验：将白色念珠菌接种于含0.005％氯化三本四氮唑的沙保培养基中，经22～25℃，24～48h培养，白色念珠菌不变色或仅淡红色，其他念珠菌或酵母菌呈红色或深红色。3）糖发酵和糖同化试验：根据这两种试验可将常见的几种念珠菌进行鉴别。第46页,共59页，星期六，2024年，5月4）动物实验：本菌对兔有致病力。给兔耳静脉注射本菌，经4～5天死亡。解剖可见肾、肝肿胀、充血，并有小脓肿，涂片及培养均可见本菌及其假菌丝存在。5）厚膜孢子形成试验：本试验亦是鉴定白色念珠菌的重要方法之一，在玉米粉聚山梨酯－80琼脂培养基培养本菌，镜检观察到厚膜孢子及假菌丝。第47页,共59页，星期六，2024年，5月第48页,共59页，星期六，2024年，5月第49页,共59页，星期六，2024年，5月4．血清学诊断用于诊断全身性念珠菌病。以念珠菌为抗原测定机体抗念珠菌抗体第50页,共59页，星期六，2024年，5月二、新型隐球菌新型隐球菌又名溶组织酵母菌，是土壤，鸽类，牛乳、水果等的腐生菌，也可存在人口腔中。可侵犯人和动物，一般为外源性感染，但也可能为内源性感染，对人类而言，它通常是条件致病菌。第51页,共59页，星期六，2024年，5月（一）生物学特性较大球形，直径可达5～20um，有肥厚的荚膜，折光性强，一般染料不易着色，难以发现，称隐球菌，用墨汁阴性显影法镜检，可见到透明荚膜包裹着菌细胞，菌细胞常有出芽，但不生成假菌丝。第52页,共59页，星期六，2024年，5月第53页,共59页，星期六，2024年，5月在沙保氏琼脂及血琼脂培养基上，于25及37℃皆可生长，而非病原性隐