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学必求其心得,业必贵于专精
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2。2。2动物细胞融合与单克隆抗体
问题导学
一、动物细胞融合
活动与探究
1.动物细胞融合过程图示是怎样的?融合完成的标志是什么?
2.诱导动物细胞融合的方法有哪些?
3.动物细胞融合的意义是什么?
迁移与应用
关于动物细胞融合的说法,不正确的是()。
A.细胞融合首先用酶解法分散成单个细胞
B.细胞融合是个细胞识别过程
C.融合细胞能表现出两个亲本的特点
D.原生质体在自然条件下常自发融合
动物细胞融合与受精作用的区别
(1)受精作用是同种生物之间进行的,精子与卵细胞的融合不需要任何诱导剂,就能形成受精卵,受精卵内具备同种生物的两个亲本的遗传物质。
(2)动物细胞融合是在不同物种间进行的细胞融合,由于物种间存在生殖隔离,所以自然条件下不能融合成杂交细胞,必须有诱导剂作用才能融合。形成的杂交细胞具备两个亲本细胞的遗传物质,从而体现两个亲本的遗传特性。
二、单克隆抗体的制备
活动与探究
1.单克隆抗体制备的原理是什么?
2.单克隆抗体制备时为什么用免疫小鼠?
3.为什么用多个B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合?
4.细胞融合后会得到哪些杂交细胞?我们需要的是哪种杂交细胞?
5.对得到的杂交瘤细胞还需哪些处理?为什么?
6.在单克隆抗体制备过程中经过了几次筛选?作用分别是什么?
7.获取单克隆抗体的场所在哪里?
8.你能写出单克隆抗体的制备流程吗?
迁移与应用
1975年科学家首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。请根据图回答问题。
(1)病原体注入小鼠体内后,要经过________细胞处理后形成抗原—MHC复合体,才能被免疫细胞识别。
(2)制备单克隆抗体所用的B淋巴细胞一般从脾中采集,然后以______________作诱导剂,使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。通过筛选和克隆培养,获得的杂交瘤细胞具有______________________________________的特点。
(3)单克隆抗体的特点是____________.根据上图写出应用杂交瘤技术获得单克隆抗体的两种主要方法:__________________________。
1.植物体细胞杂交与动物细胞融合比较
植物体细胞杂交
动物细胞融合
生物学原理
膜的流动性
前期处理
原生质体制备:纤维素酶和果胶酶处理
细胞分散:胰蛋白酶处理
方法和手段
①物理法:离心、振动、电激等
②化学法:聚乙二醇(PEG)
①物理法:离心、振动、电激等
②化学法:聚乙二醇(PEG)
③生物法:灭活的病毒
应用
进行远缘杂交,创造植物新品种等
制备单克隆抗体等
2.植物体细胞杂交和单克隆抗体制备比较
比较项目
植物体细胞杂交
单克隆抗体制备
理论基础
细胞的全能性、细胞膜的流动性
细胞膜的流动性、细胞增殖
融合前
的处理
纤维素酶、果胶酶除去细胞壁
获得免疫的B淋巴细胞
促融
(1)物理法:离心、振动、电激;
(2)化学法:聚乙二醇
(1)物理法:离心、振动、电激;
(2)化学法:聚乙二醇;
(3)生物法:灭活的病毒
过
程
答案:
课前·预习导学
【预习导引】
一、1.两个一个细胞
2.杂交细胞
3.流动性
4.灭活的病毒
5.有性杂交远缘
6.单克隆抗体
二、1.不能无限无限单个骨髓瘤细胞无限专一
2.(1)B淋巴骨髓瘤杂交瘤特定抗体体外腹腔(2)增殖专一(3)强高
3.(1)诊断抗原抗原准确快速(2)癌症生物导弹
预习交流:
1.提示:细胞融合。原理是细胞膜具有一定的流动性.
2.提示:动物细胞融合时特有的生物融合剂是灭活的病毒。
课堂·合作探究
【问题导学】
一、活动与探究:
1.提示:
动物细胞融合完成的标志是来自不同细胞的两个或多个细胞核融合成一个细胞核。
2.提示:(1)物理法:电激、离心、振动等;
(2)化学法:聚乙二醇(PEG);
(3)生物法:灭活的病毒。
3.提示:克服了远缘杂交的不亲和性,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。特别是利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术,为制造单克隆抗体开辟了新途径.
迁移与应用:D解析:动物细胞融合首先用胰蛋白酶将细胞分散成单个细胞;动物细胞融合首先是一个细胞识别过程,然后进行细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合;融合细胞获得了两个亲本的遗传物质,能表现出两个亲本的特点;原生质体在自然条件下一般不会自发融合,需要诱导剂诱导。
二、活动与探究:
1.提示:(1)一个B淋巴细胞只产生一种特异性抗体,肿瘤细胞具有无限增殖的特点。
(2)细胞融合产生的杂交瘤细胞可以保持亲代双方的特性:既能无限增殖,又能产生单一抗体。
2.提示:免疫小鼠能产生相应的B淋巴细胞,从而产生抗体.
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