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蓝莓花青素的提取及抗氧化性分析

作者：凌云

来源：《食品界》2020年第12期

摘要：本文借助正交试验以及单因素试验获得提取蓝莓花青素的最佳条件，分别是80%甲

醇，1：10的料液比，80°C的温度，30min的时间以及3.5的pH值。在浓缩提取物之后，借助

聚酰胺树脂纯化从蓝莓中提取出来的花青素，能够获得较高纯度的样品。纯化完成后，测定所

得花青素抗氧化性，经由试验可知，其能够有效清除DPPH自由基以及OH自由基。

关键词：蓝莓;花青素;提取;抗氧化性;甲醇

实验材料以及方法1.

材料、仪器与试剂1.1

采购适量的市售蓝莓浆果、紫外可见分光光度计、旋转蒸发仪、酶标仪、高速离心机以及

花青素标品。实验所用的分析纯主要有乙醇、甲醇、香草醛以及盐酸等。此外还会应用Vc、

聚酰胺吸附树脂以及DPPH自由基等。

预处理1.2聚酰胺树脂

向三角瓶中放适量聚酰胺树脂，随后加浓度为95%的乙醇（4倍体积）进行浸泡，并且过

夜放置，继而将浸泡液清理掉，完成厚用浓度为95%的乙醇将其洗到洗涤液内，并将3倍体积

的水添加其中，直至不会有白色的浑浊物，最终用水进行清洗，确保不再有醇的味道后进行抽

滤、抽干，处理后留下以备后用。

蓝莓1.3预处理

选出一部分蓝莓，在此過程中应当将破碎以及没有成熟的蓝莓处理掉，随后把选好的样品

放到冰箱里（设置-20°C的温度），等到实验需要的时候将样品取出来，取出之后对其进行捣

碎，直至其呈现出匀浆的状态。

实验方法2.

配置2.1试剂

以甲醇为主要溶剂配置有1∶1显色剂体积的两类试剂：第一种试剂为1%浓度的香草醛溶

液，第二种试剂为8%浓度的盐酸溶液，试剂都是在需要的时候进行现配，随后配置有0.1%浓

度盐酸以及浓度不同、pH值3.5甲醇混合液。

提取蓝莓花青素的主要程序2.2

破碎蓝莓鲜果1.;2.浸提甲醇;3.过滤;4.离心处理;5.获得蓝莓花青素的提取液;6.吸附聚酰胺树

脂;7.洗脱60%的乙醇;8.旋蒸处理;9.纯化蓝莓花青素;10.萃取石油醚;11.石油醚的回收处理;12.展

开显色研究。

配置标准溶液、制作相应曲线2.3

以甲醇为主要溶剂对蓝莓花青素的标液进行配制，标液拥有1.2g/L的浓度。随后移取1-

5ml溶液五份，分别用甲醇溶剂进行定容，最终定为10mL。完成定容之后，分别取出1mL溶

液并且各自加入到显色剂（5ml）当中，将其摇匀，并进行避光处理，随即将其放入恒温水浴

当中进行30min的保温处理，进而将其放置到500nm的波长当中对吸光值进行测定，最后对

蓝莓花青素标液标准曲线进行绘制。

蓝莓花青素的提取率受提取条件的2.4影响

选出蓝莓5g，将其粉碎，随后将适量盐酸-甲醇混合液添加其中，并且在相应温度环境中

进行搅拌和提取，对提取液进行30min离心处理，将上清液提取出来并利用聚酰胺树脂对其进

行纯化处理，最终展开研究。对蓝莓花青素进行提取的时候，要在超声功率、料液比、浸提液

的浓度、时间与温度等都不同的条件下进行，各做平行试验3个，对相应提取率进行考察。

纯化蓝莓花青素2.5

对花青素进行提取、抽滤，所得提取液为紫红色，随后纯化提取液，选用的洗脱剂是60%

浓度的乙醇溶液，对样品进行采集。

测定纯度2.6

定容提取液至100mL，借助标准曲线对花青素浓度进行计算，随即将相应质量以及纯度计

算出来。

分析和探讨3.

确3.1定最大的吸收波长

在室温环境下借助盐酸-香草醛溶液对蓝莓花青素的标准样品展开避光处理，随后于分光

光度计当中展开300-700nm波长范围内的扫描，能够获得500nm的最大吸收波长，其属于蓝

莓花青素特征吸收的相应波长。

开展3.2单因素试验

香草醛和花青素产生反应的最终产物，一旦受到光照便会呈现出不稳定的状态，所以在进

行相应检测的时候，检测人员应该进行避光处理。

确定最佳提取工艺条件3.3

通过观察试验以及方差分析的相应结果可知，温度有最大极差，由此可见，温度对提取效

果有较大影响，位列其后的分别为料液比、提取时间以及甲