黔北麻羊SIRT1基因睾丸组织表达及其过表达对间质细胞发育和抗氧化能力的.pdfVIP

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南方农业学报JournalofSouthernAgriculture2023,54(12):3665-3673

ISSN2095-1191;CODENNNXAAB

DOI:10.3969/j.issn.2095-1191.2023.12.021

黔北麻羊SIRT1基因睾丸组织表达及其过表达

对间质细胞发育和抗氧化能力的影响

陈家靖,陈祥,张远,骆金红,嵇桃桃,唐文,付开斌

*

(贵州大学动物科学学院/高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室/贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室,

贵州贵阳,550025)

摘要:【目的】分析沉默信息调节因子1(SIRT1)在黔北麻羊不同月龄睾丸组织与12月龄性腺轴组织中的表达水

平,以及对睾丸间质细胞发育及抗氧化能力的影响,为探明SIRT1基因调控睾丸间质细胞生长发育机制提供理论基

础。【方法】以1、3、6、9和12月龄健康的黔北麻羊公羊为研究对象,采用实时荧光定量PCR检测不同月龄睾丸组织及12月

龄性腺轴组织(下丘脑、垂体、睾丸和附睾)中SIRT1的表达量;将过表达载体pEGFP-N3-SIRT1和空载体pEGFP-N3转

染至山羊睾丸间质细胞,运用CCK-8法检测细胞的增殖情况,划痕试验检测细胞迁移效率,利用实时荧光定量PCR检

测细胞增殖、发育及抗氧化相关基因的表达量。【结果】SIRT1基因在3、6、9和12月龄睾丸组织中的表达水平均显著高

于1月龄(P0.05,下同),以12月龄的相对表达量最高;在性腺轴上,睾丸组织中SIRT1基因相对表达量显著高于下丘

脑、垂体和附睾。CCK-8法结果显示,过表达SIRT1基因在12h后极显著促进睾丸间质细胞的增殖(P0.01);划痕试

验发现,过表达SIRT1基因组在9和18h的细胞迁移率均显著高于空载体组;实时荧光定量PCR结果显示,过表达

SIRT1基因可显著促进睾丸发育相关基因[胰岛素样生长因子2基因(IGF2)],细胞增殖相关基因[增殖细胞核抗原基

因(PCNA)]和抗氧化相关基因[超氧化物歧化酶基因(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶1基因(GPx1)和血红素加氧酶1基

因(HO-1)]的表达,对抗氧化相关基因[核因子E2相关因子2基因(Nrf2)]的表达无显著影响(P0.05)。【结论】SIRT1

基因在黔北麻羊不同月龄的睾丸组织中均有表达。成功将过表达SIRT1基因表达在睾丸间质细胞,且可能通过提高

黔北麻羊睾丸间质细胞中相关基因的表达,促进细胞增殖和发育,并提高其抗氧化能力,进而直接或间接影响睾丸间

质细胞的生理功能。

关键词:黔北麻羊;SIRT1基因;睾丸间质细胞;发育;抗氧化

中图分类号:S827.8文献标志码:A文章编号:2095-1191(2023)12-3665-09

TesticulartissueexpressionofSIRT1geneinQianbeiMagoat

andeffectsofitsoverexpressiononLeydigcelldevelopment

andantioxidantcapacity

CHENJia-jing,CHENXiang*,ZHANGYuan,LUOJin-hong,JITao-tao,

TANGWen,FUKai-bin

(SchoolofAnimalScience,GuizhouUniversity/KeyLaboratoryofGeneticBreedingandBreedingofPlateauMountain

Animals,MinistryofEducation/GuizhouKeyLaboratoryofAnimalGenetics,Breedi

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