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试验技能(二)变量梯度设置在试验中的应用
一般淀粉酶的最适温度在40~60℃之间,而极端耐热淀粉酶在100℃仍能保持较高的活性,因此在生产上具有更为广泛的应用前景。请回答有关问题:
(1)要鉴定该酶的化学本质,可将该酶液与___________________________混合,若反应液呈________色,则该酶的化学本质为蛋白质。
(2)测定淀粉酶活性时,应选择________作为该酶作用的底物,反应液中应加入________溶液以维持其酸碱度稳定。
(3)设计试验探究极端耐热淀粉酶起催化作用的最适温度。
①此试验中除自变量和因变量外,还须要考虑_______________________________(指出两点即可)等因素。
②结合题目信息,简要写出探究该酶催化作用最适温度的试验思路:
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
解析:大多数酶是蛋白质,少数酶是RNA,要鉴定该酶的化学本质,可将该酶液与双缩脲试剂混合,若反应液呈紫色,则该酶的化学本质为蛋白质。
答案:(1)双缩脲试剂紫(2)淀粉(酸碱)缓冲
(3)①淀粉溶液的浓度和含量、pH及添加试剂的量、试验操作依次等②在40℃和100℃之间每隔肯定温度设置一个试验组,其他试验条件相宜且保持一样。以反应液和碘液发生颜色反应的程度为指标确定最适温度
1.概述
变量梯度指自变量相邻两次取值之间的差值大小,即自变量每次改变的幅度。生物试验中常见的变量梯度有pH梯度、温度梯度、浓度梯度等。
2.过程分析
(1)在合适范围内取值:生物体或细胞生活在特定的环境中,探讨某因素对生物或细胞的影响时,自变量应在它能发挥作用的范围内取值。如确定生长素类似物促进扦插枝条生根的相宜浓度,生长素浓度应在10-12~10-8mol/L范围内,变量梯度应相差一个数量级。
(2)梯度大小设置要相宜:梯度过小,看不出改变,试验组数增多,增加了操作难度;梯度过大,试验结果不精确。如探究唾液淀粉酶的最适pH,预料其数值应在7.0左右,pH梯度设为0.4,即共做五组试验,其缓冲液pH分别为6.2、6.6、7.0、7.4、7.8。
(3)依据试验目的确定变量梯度的大小
①若进行定性分析,梯度设置可稍大些。如探究温度对光合作用的影响,一般状况下植物在30℃左右时,光合作用最强。我们既要探讨温度降低时间合作用强度的改变,也要探讨温度上升时的改变,温度梯度设置如下:0℃、10℃、20℃、30℃、40℃。
②若要进行定量分析,梯度设置应小些。如探究光合作用的最适温度,温度梯度设置如下:24℃、27℃、30℃、33℃、36℃。
(4)在实际操作中,为避开因梯度设计不当,造成人力物力方面的奢侈,我们可以设计一个预试验,每组之间梯度适当加大一些,当找到一个大致的相宜范围后,再在这个范围内缩小每组之间梯度值,最终测出一个精确范围。
1.某生物爱好小组用迎春枝条作试验材料,做了探究α-萘乙酸(NAA)促进插条生根最适浓度试验的预试验,结果如下图。请依据预试验结果,设计进一步的探究试验。
(1)材料用具:生长旺盛的一年生迎春枝条若干、烧杯、量筒、培育皿、NAA、蒸馏水等。
(2)配制溶液:配制浓度依次为_____________________________________________(溶液浓度梯度为0.5ppm)的NAA溶液9份,并编号1~9。
(3)试验步骤:
第一步:______________________________________________________________;
其次步:______________________________________________________________;
第三步:一天后取出枝条分别进行扦插;
第四步:每天对扦插枝条的生根状况进行视察记录。
(4)请设计本试验的视察记录表。
(5)该试验应限制好两个主要的无关变量,详细方法是________________、________________。
解析:依据预试验的结果,可确定进一步探究的浓度范围是2~6ppm,再依据题中要求浓度差为0.5ppm,可确定要配制的浓度梯度为2ppm、2.5ppm、3ppm,3.5ppm、4
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