微生物学检验技术 课件 25项目二十五：分枝杆菌鉴定.pptx

项目二十五分枝杆菌鉴定

学习目标1．掌握结核分枝杆菌的主要生物学特性、微生物学检验方法及鉴定依据。2．熟悉麻风杆菌主要生物学特性、微生物学检验方法及鉴定依据。3．具有正确采集和处理常见结核分枝杆菌感染后检验标本及进行相关检测的能力。4．能对结核分枝杆菌各种检验结果的正确判断和分析试验结果并发出检验报告。项目二十五分枝杆菌鉴定

项目二十五分枝杆菌鉴定思维导图

一、分枝杆菌属的概述项目二十五分枝杆菌鉴定

一、分枝杆菌属的概述概述1.分枝杆菌属（Mycobacterium）为一类细长或略弯曲、有时呈分枝状的杆菌。是分枝杆菌科内唯一菌属，DNAG+Cmol%为62~70，种类很多，有结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌及其他分枝杆菌。2.分枝杆菌属专性需氧，主要特点是细胞壁含有大量脂质，可占其干重的60%，一般不易着色，需要用抗酸染色法进行染色，染色后呈红色。3.分枝杆菌属无荚膜，无芽胞，不产生外毒素、内毒素及侵袭性酶，其致病主要与菌体成分有关，引起的疾病呈慢性。

二、结核分枝杆菌的鉴定项目二十五分枝杆菌鉴定

1.生物学性状（1）形态与染色：菌体细长或略微弯曲，无荚膜，无鞭毛，无芽胞，革兰阳性，但不易着色，一般用齐-尼抗酸染色法染色，菌体呈红色。二、结核分枝杆菌的鉴定结核分枝杆菌

1.生物学性状（2）培养特性：专性需氧，营养要求高，需在含有血清、蛋黄、甘油、马铃薯等培养基（如罗氏培养基）上才能生长35℃~40℃均可生长，最适PH值6.5~6.8，生长缓慢，需要2~4周才能长出菌落，菌落呈干燥颗粒状，不透明，米白色或米黄色，表面粗糙，似菜花。二、结核分枝杆菌的鉴定结核分枝杆菌

1.生物学性状（3）生化反应：该菌不发酵糖类，能产生触酶，而耐热触酶试验大多为阴性，非结核分枝杆菌则大多为耐热触酶试验阳性。人型结核分枝杆菌烟酸试验，硝酸盐还原和烟酸试验均为阳性，可借此与牛型结核分枝杆菌进行鉴别二、结核分枝杆菌的鉴定结核分枝杆菌

1.生物学性状（4）抵抗力三耐：耐干燥---细胞壁的脂质可防止菌体内水分丢失在干燥痰中可存活数月耐酸或碱----对3%盐酸或6%硫酸及4%庆阳环有抵抗力耐染料-----对结晶紫（1：75000）和孔雀绿（1：13000）有抵抗力三敏感：对乙醇敏感对湿热敏感（62℃~63℃，15min或煮沸即可杀死）对紫外线敏感二、结核分枝杆菌的鉴定结核分枝杆菌

1.生物学性状（5）变异性1）形态变异2）菌落变异3）毒力变异-----卡介苗（BCG）4）免疫原性变异5）耐药性变异二、结核分枝杆菌的鉴定结核分枝杆菌

2.临床意义（1）主要致病物质：结核分枝杆菌不产生内、外毒素，其致病性与细菌在组织细胞内大量繁殖引起炎症，菌体成分及代谢产物以及机体对菌体成分产生的免疫损伤有关。1）脂质：脂质含量与毒力关系密切2）蛋白质3）多糖二、结核分枝杆菌的鉴定结核分枝杆菌

2.临床意义（2）所致疾病：该菌通过呼吸道、消化道和受损皮肤进入机体引起结结核病。其中肺结核最多见。（3）免疫学与超敏反应1）免疫性结核杆菌是胞内感染，免疫是以T细胞为主的细胞免疫，接合的免疫属于带菌免疫。机体感染结核分枝杆菌后，也可产生多种抗体，但这些抗体对机体无保护作用。2）超敏反应机体在抗结核免疫的同时，也形成了对结核分枝杆菌的迟发型超敏反应。3）结核菌素试验二、结核分枝杆菌的鉴定结核分枝杆菌

1、原理：用结核菌素进行皮肤试验，来检测受试者对结核分枝杆菌是否具有免疫功能及迟发型超敏反应的一种试验。2、方法：用旧结核菌素（OT）5U或结核菌素衍生物PPD5U注射于前臂屈侧皮内，48~72小时后观察结果。3、结果：观察注射部位是否出现红肿或硬结无红肿或硬结5mm为阴性，表示受试者无免疫力红肿或硬结≥5mm，为阳性，表示受试者有免疫力红肿或硬结≥15mm，为强阳性，提示受试者有结核分枝杆菌感染4、临床意义：1）卡介苗接种效果判断；2）作为婴幼儿结核病的辅助诊断；3）测定肿瘤患者等细胞免疫功能二、结核分枝杆菌的鉴定附：结核菌素试验

3.微生物学检验（1）标本采集：根据感染部位的不同，可采取不同的标本，结核病患者各感染部位的标本中大多混有其他杂菌，为此采取能抑制污染菌的方法，若需分离培养，必须使用灭菌容器，患者应停药1~2天后再在即标本。二、结核分枝杆菌的鉴定（一）铜绿假单胞菌

3.微生物学检验（2）检验程序二、结核分枝杆菌的鉴定结核分枝杆菌

3.微生物学检验（3）检