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课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段
学习目标:1.理解PCR的原理。(重点)2.体验PCR这一常规的分子生物学试验的方法。(难点)3.了解PCR的应用。(重点)
1.PCR扩增的原理和过程
(1)细胞内DNA复制过程的解析
解旋:在解旋酶作用下,DNA两条链打开,形成两条DNA单链
↓
引物结合:在DNA单链3′端,通过碱基互补配对与DNA母链结合
↓
DNA聚合酶结合:DNA聚合酶与模板链结合,标记着单链合成起先
↓
子链合成:DNA聚合酶从引物3′端起先,将配对的脱氧核苷酸连接起来
↓
后续加工:将引物切去,并合成空缺处的DNA单链,再由DNA连接酶将不连续
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