轴突导向因子的研究进展 .pdfVIP

目的：观察局灶性脑梗死大鼠皮质轴突生长导向因子-1

(netrin-1，Ntn1)和臂板蛋白3a(semaphorin-3a，sema3a)的表

达及电针干预对其表达的影响。探索Ntn1与sema3a在电针对脑梗

后神经可塑性影响中的作用。

方法：将135只雄性Sprague-Dawle（SD）大鼠分为正常

组(n=15)、模型组(n=60)及电针组(n=60)。利用线栓法制作大

脑中动脉闭塞（middlecerebralarteryocclusion，MCAO）

模型，并行longa评分。2，3，5—氯化三苯基四氮唑（TTC）

染色与苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosinstaining，HE)

染色确定造模成功。电针选穴“内关”(PC6)，“足三里”(ST36)，

刺激参数为疏密波，频率80～100Hz，强度以保持针刺局部轻

微颤抖为度，留针30min。电刺激在大鼠麻醉苏醒后90min

进行。分别在术后1d、3d、7d、14d时，对术后大鼠进行神经

功能评分(modifiedneurologicseverityscores，mNSS)，

利用免疫组化检测缺血侧大脑脑皮质中Ntn1、sema3a、神经丝

蛋白200(NF200)分布和表达，免疫印迹法检测缺血侧大脑皮

质Ntn1和sema3a的蛋白表达。

结果：免疫组化结果显示在各个时相点大鼠脑皮质均表达Ntn1

和sema3a，主要集中在细胞质阳性表达。Westernblot检测结

果显示，与正常组相比，模型组Ntn1蛋白的表达水平在脑梗

死后1d即开始明显上升(P＜0.01)，3d时呈上升趋势(P＜

0.01)，7d时达峰值(P＜0.01),14d时仍显著高于基础水平(P

＜0.01)，电针组与模型组相比，Ntn1蛋白表达趋势相同，但

表达量明显高于模型组，术后1d、3d、7d、14d时有统计学差

异(P＜0.05，P＜0.01).与正常组相比，模型组sema3a蛋白的

表达水平在术后1d即开始上升(P＜0.01),7d时达高峰(P＜

0.01),14d时仍高于基础水平(P＜0.01)。同时相点电针组与模

型组相比sema3a均呈现低表达，1d、3d和7d、14d时有统计

学差异(P＜0.05，P＜0.01)，峰值同样在7d时出现。Western

blot检测结果与免疫组化分析结果基本相符。7d、14d时电针

组与模型组相比mNSS评分存在统计学差异(P＜0.05),14d时

电针组与模型组相比NF200的表达量存在统计学差异(P＜

0.05)。结论局灶性脑梗死后大鼠皮质Ntn1与sema3a表达明

显上调，给予电针干预后可提高Ntn1的表达并抑制sema3a

的表达，促进轴突的再生与修复，这可能是电针促进脑梗死后

神经功能恢复的机制之一。

关键词：脑缺血再灌注;电针;轴突生长导向因子-1;臂板

蛋白3a

AbstractObjectiveToobservetheexpressionofnetrin-1(Ntn1)

andsemaphorin-3a(sema3a)inthecortexofratsaftermiddle

cerebralocclusion(MCAO)，anddeterminetheeffectof

electro-acupuncture(EA)interventionontheirexpression，soas

toexploretherolesofNtn1andsema3ainneuralplasticityafter

cerebralinfarction．

MethodsAtotalof135maleSpragueDawley(SD)ratswere

randomlydividedintocontrolgroup(n=15)，modelgroup(n

=60)andEAgroup(n=60，intheacupuncturepointsPC6and

ST36，80to100Hz，1to3mA，1to3V，for30min，performed

in90minafteranesthesiarecovery)，and