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微量残留白血病检测方法及对急性白血病的临床意义

急性白血病患者经化疗后达到完全缓解可达80%，但5年存活率仅30～

40%[1]，究其根源是完全缓解后，体内仍含少量白血病细胞。因此，对于微量残

留白血病（MRD）的检测可更早预测急性白血病的复发。本文对MRD检测方法

以及对急性白血病的临床意义进行综述。

标签：微量残留白血病；检测；急性白血病

检测方法：MRD常用的监测方法分以下几类：细胞遗传学方法、分子生物

学方法和免疫学方法。但这些方法都有一定局限性不能理想监测MDR。

1细胞遗传学方法

1.1染色体核型分析

多数白血病细胞伴随染色体核型的异常，如在AML中出现异常分裂象或数

量结构的改变。用此法检测MRD的个体差异大且敏感性差，近年此法研究少在

此不多叙述。

1.2荧光原位杂交技术

荧光原位杂交技术（FISH）是利用荧光标记的特异染色体为探针检测白血

病细胞中染色体的异常。改善了传统染色体核型分析的缺点，具有高敏感度且操

作简单等优点，可短时间分析较多的骨髓、外周血或组织细胞，检出难以识别的

基因异常及断裂点的异常。由于其检测的靶分子为基因，可避免由于表面抗原的

改变造成的假阴性等问题。

荧光原位杂交技术的临床意义：在中国APL在AML中占有很大比例，90%

以上的APL具有特征性融合基因PML-RARα，FISH为检测APL-MRD最常用的

方法。黄正刚等[2]用FISH检测了30例已达完全缓解并经三轮巩固治疗后的APL

患者，发现融合基因PML-RARα持续阳性的有3例并最终复发。张济等[3]用FISH

检测34例完全缓解的APL患者，9例PML-RARα融合基因阳性的患者中3例

检测结果为阴性；经巩固维持治疗后，4例PML-RARα融合基因阳性的患者中2

例检测结果为阴性。所以，FISH检测APL-MRD的敏感性有待提高。

2免疫学方法

2.1多参数流式细胞仪检测（MFC）

因成本較低准确度敏感度较高，为目前应用最广的方法，它是依据识别在白

血病细胞表面联合表达的特异白血病相关免疫表型（LAIPs）。能快速对单个细

胞进行多参数分析，根据正常细胞与白血病细胞表达免疫表型的不同，可在104

个细胞中检测出一个白血病细胞。但在化疗过程中，免疫表型可发生改变出现假

阴性，要提高检出率可结合初诊LAIPs再辅以检测其他抗体组合，也可同时检

测外周血和骨髓来提高检出率。但目前并没有标准化的抗体组合，且个体间差异

也较大。

2.2多参数流式细胞仪监测MRD的临床应用

MRD复发的患者检出LAIPs往往与患者初发时LAIPs相同，因此残留的白

血病细胞会保持初期白血病细胞异常抗原的特征，可用MFC针对性的检测MRD

患者初期抗原的免疫表型。研究表明，用MFC检测与AML密切相关的细胞特

异性LAIPs信号，检出LAIPs阳性细胞的患者有60%在造血干细胞移植后复发。

而检测LAIPs阴性的患者复发率极低。利用MFC对白血病细胞LAIPs的分析对

AML患者预后有提示作用。

3分子遗传学方法

3.1实时荧光定量PCR（RQ-PCR）

RQ-PCR在普通PCR中加入与PCR产物结合的荧光探针或染料，可以在每

一次循环中通过荧光强度的变化达到定量检测。可持续性检测白血病细胞的异常

融合基因，突变基因等，动态观察患者体内融合基因表达水平变化，灵敏度可达

106。用此法检测MRD比细胞遗传学法早数月。也可避开由于患者免疫表型改

变造成假阴性。但其成本较高，普及难度大。

3.2实时荧光定量PCR监测MRD的临床意义

高海涛等[4]持续监测20位AML患者治疗后的ETO融合基因表达水平，其

中15位患者的表达水平直至观