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SELEX技术及其在肿瘤诊治中的应用进展

摘要】指数式扩增配体的系统进化(Systematicevolutionofligandsbyexponential

enrichmentSELEX)技术是一类新的体外组合化学筛选技术，通过它能获得高效地

与多靶物质特异性结合的单链或双链寡核苷酸适配子(aptamer)，目前已广泛应用

于肿瘤的诊断与治疗中。SELEX技术获得的适配子与蛋白质类抗体相比具有多种

优势，展现出了在肿瘤诊断和治疗方面的极大潜能。本文主要就SELEX技术在肿

瘤诊断和治疗两方面的应用进展作一综述。

【关键词】SELEX技术；核酸适配子；肿瘤诊断；肿瘤治疗

指数式扩增配体的系统进化技术(Systematicevolutionofligandsbyexponential

enrichment，SELEX)是一项由Ellingtong和Tuerk[1,2]在20世纪90年代初建立的体

外组合化学筛选技术，由其获得的核酸适配子(aptamer)，是一段具有明确三级构

象的短的单链或双链寡核苷酸序列，即DNA(ssDNA、dsDNA)或RNA。核酸适配子

的出现，改变了人们对核酸只能做遗传物质的传统认识，利用核酸结构的多样性，

可使核酸适配子高效、特异地结合各种与之空间构象互补的靶分子。利用SELEX

技术筛选获得适配子识别靶分子的模式与抗体类似，但与蛋白质类抗体相比，核

酸类适配子具有更多的优越性，如结合力强、亲和力高、特异性好、库容量大、

靶分子范围广等[3]。这些特性使得核酸适配子在疾病的诊断与治疗领域成为更为

有效的工具。

1SELEX技术的基本原理

SELEX过程包括以下几个步骤[4]：①构建文库：在体外人工构建一个含有

1012～1015个随机寡核苷列文库，随机寡核苷酸片段的长度一般为20～40bp；

②筛选、分离：在适宜条件下,使随机单链寡核苷酸序列与靶分子相互作用，分

离出与靶分子特异结合的寡核苷酸序列；③扩增：PCR扩增特异结合的寡核苷酸

适配子，用作新一轮筛选。以上三步构成一轮完整的SELEX过程。重复筛选、分

离、扩增的循环步骤5～15轮，特异性适配子不断得到富集，最后得到高特异性、

高亲和力的适配子。

2SELEX技术在肿瘤诊治中的应用

虽然抗体是目前应用于人类肿瘤诊治过程中进行分子识别的主要物质，但是

核酸适配子表现出的高敏感性、低毒性、低免疫原性和小分子量等优势[5]，弥补

了抗体在诊断领域中的不足，使得核酸适配子可以代替其成为理想的肿瘤诊断和

治疗试剂。

2.1SELEX技术在肿瘤诊断中的作用

由SELEX筛选技术得到的核酸适配子因为其便于进行化学修饰和二、三级折

叠构象改变的特点，常与其他技术结合，应用于肿瘤标志物的检测。

2.1.1体内肿瘤分子成像

肌腱蛋白-C(tenascin-C，TN-C)是肿瘤组织基质中表达的一种胞外蛋白，在肿

瘤生长中过度表达。Hicke等[6]以TN-C高表达的U25l神经胶质母细胞瘤细胞系为

靶标，通过SELEX技术筛选得到能够与TN-C特异结合的核酸适体TTA1，将其用

放射性同位素99mTc标记，注射到种植了人胶质母细胞瘤和乳腺癌的裸鼠模型体

内，检测Tenascin-C，通过二维闪烁成像能获得清晰的肿瘤图像。研究表明，

TTA1能被肿瘤组织快速摄取并滞留较长的时间，而在血液和其他非靶标组织中却

被迅速清除，这一特点使之非常适用于肿瘤的影像诊断[7]。

2.1.2肿瘤相关蛋白检测

随着SELEX技术的发展，越来越多能与细胞外、细胞膜上、细胞内肿瘤相关

蛋白靶向结合的具有抗肿瘤特性的核酸适配子已经应用于临床肿瘤诊断中[8]。其

中与肿瘤相关膜抗原特异性结合的适配子应用更为广泛、成熟。

2.1.2.1前列腺特异性膜抗原

前列腺特异性膜抗原（PSMA）是一种只在前列腺癌细胞表面高表达而在正常

细胞表面不表达的高特异性膜结合蛋白，因此成为检测前列腺肿瘤细胞的标志物。

Lupold[9]等人利用SELEX技术筛选出两种适配子A9和A10来阻断纯化的胞外

PSMA结构域。这是首次报道RNA适配子能与肿瘤相关的膜抗原特异性结合。

Chu[10]等把该种核酸适配子连接到发光纳米晶体上，发现这种结合物能与过表达

PSMA的固定细胞及活体细胞特异性结合，可作为前列腺癌的