抗人VEGF人源化抗体及基因工程抗体真核高产量表达技术的研究.pdfVIP

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斟硼成果・ＢｕｌｌＭｅｄＲｅｓ，Ｊｕｌｙ２ＯＯ２，Ｖｏ１．３１Ｎｏ．７

・

经济效益：从１９９７年１２月开始研发基因芯片制率可达４１％，对裸鼠移植人胃癌的抑制率可达

技术至２００１年５月，所获经济收益已超过１亿元人７６．２％，如合并使用胃癌单抗与”Ｉ的偶合物，可

民币。社会效益：在国家的积极政策引导下，复旦使４／５裸鼠无瘤生存，抑瘤率增加８４．０％。在小鼠

大学生命科学研究院成功实践了“将科技转化为生自发乳癌肺转移模型ＩＶＴＡ２ＭＡ一８９１中，该多抗能

产力”的号召。高密度ｅＤＮＡ基因芯片的成功开显著抑制肿瘤的转移，抑制率达７３．０％。以

发，为我国科研人员及时提供了适合国情的基因组ＶＥＧＦ１６５免疫ＢＡＬＢ／ｅ小鼠，采用杂交瘤技术获得

学研究手段。寡核苷酸芯片技术的建立以及检测芯１４株单抗，其中９株具有良好的中和活性，６株在

片的研制成功，将有助于提高我国临床医学的基因动物实验中表现良好的抑制肿瘤生长及转移的作

诊断水平。尤其是Ｇ６ＰＤ缺陷和地中海贫血检测基用。其中Ｄ１１（ＶｍＤ１１）对原发瘤及肺转移的抑制

因芯片的推出，将有助于减少这两种遗传缺陷儿的率分别达８３．４％及７１．９％，被选为构建人一鼠嵌合

出生，从而提高我国的优生优育水平。随着基因芯抗体的亲本。

２．ＶＥＧＦ人一鼠嵌合抗体的研制：由ＶｍＤ１１杂

片技术的深层次开发，整合性基因芯片技术平台将

交瘤细胞中克隆了ＶＥＧＦ抗体的轻、重链可变区基

会创造更大的经济效益和社会效益。

因，测序后将其分别克隆入ｐＡＣＹＣ—ｎｅｏ～Ｃｔ￣和

（收稿：２００１—１１一Ｏ４）

ｐｓｖ２一ｇｐｔ—Ｃ７１表达载体中，以Ｌｉｐｏｆｅｅｔｉｎ共转染

ｓｐ２／Ｏ细胞。选择培养后，经筛选获得阳性克隆，

厂—＋。、

＋＋其上清中人一鼠嵌合抗体的表达量仅为１０，￣ｔｇ／Ｌ。采

：抗人ＶＥＧＦ人源化：用本项目研制的真核高效表达载体系统，其表达量

｛抗体及基因工程；ｉ可达６０ｍｇ／Ｌ，提高６，０００倍。经亲和层析及凝胶

过滤纯化后，纯度可达９５％。一系列的分析表明，

了了ＶＥＧＦ人一鼠嵌合抗体ＶｅＤ１１的Ｖ区来自亲本抗体，

；抗体真核高产量；为鼠源性，具有亲本抗体的特异性及亲和力，其恒

！ｉ表达技术的研究：ｉ定区来自人源Ｉ异Ｇ的Ｃ７１及Ｃｆｃ，人源成份占全抗体

的２／３。ＶｃＤ１１具有良好的中和ＶＥＧＦ的生物活性，

ｔｔ４￣Ｃ存放５个月，３７￣Ｃ放置６天，性能稳定。在动

＋ｉ中国医学科学院肿瘤医院（１０００２１）＋；物实验中，该嵌合抗体对小鼠自发乳癌肺转移模型

十杨治华