带BAC质粒的重组伪狂犬病病毒的构建及其体外生长特性研究的开题报告.pdfVIP

带BAC质粒的重组伪狂犬病病毒的构建及其体外生

长特性研究的开题报告

文献综述：

伪狂犬病病毒（Pseudorabiesvirus,PRV）是一种由猪传播的高度传

染性病毒，也称为猪链球菌性脑形状体病毒。PRV属于疱疹病毒科，是

一种双链DNA病毒，具有非常高的传染性和致死性，对于猪的养殖产业

造成了巨大的损失。近年来，随着疫苗研制和改良的进行，PRV的病例

数量在不断减少，但其仍然对于猪的健康和经济产生了威胁。

PRV的研究一直是病毒学领域的热点之一，其作为一种模型病毒，

被广泛用于动物模型的开发和研究，用于神经元追踪、神经回路的研究

等。此外，PRV也被用作疫苗载体进行生物学研究和疫苗研制。

PRV的基因组结构已经被广泛地研究，其主要包括，早期、晚期和

延迟基因及非编码RNA等，其中早期基因参与病毒DNA合成和转录调控，

晚期基因包括了病毒的结构蛋白和酶等，延迟基因更多地参与细胞细胞

凋亡、诱导细胞生长和细胞周期等。在PRV的基因组中，病毒酶RNA聚

合酶II是一个比较重要的酶，它是病毒DNA合成的必需酶，可以转录所

有PRV的基因。

BAC（bacterialartificialchromosome）质粒技术已经被广泛地应用

于基因工程领域，可以实现对于大分子基因组的高效和准确的编辑和构

建，包括病毒基因组的编辑和重组研究。因此，利用BAC质粒技术对

PRV的基因组进行编辑和改造，可以为病毒学的研究提供一个重要的平

台，也可以为疫苗的研发和改良提供基础。

研究内容和方法：

本论文的主要目的是利用BAC质粒技术构建一种带有BAC质粒的重

组PRV，通过对于该病毒的体外生长特性进行研究，探究重组PRV的基

因组编辑和酶活性的改变对于病毒体外生长过程的影响。

主要的研究方法包括

1.提取和纯化PRV基因组DNA和BAC质粒DNA，并进行PCR扩增

和酶切等操作；

2.利用逆反应PCR和脱氧核苷酸酶进行基因编辑和突变；

3.将编辑和重组后的PRV基因组插入到BAC质粒中，并通过筛选和

测序的方法对于突变和插入效果进行鉴定；

4.利用转染的方法将重组的PRV引入到宿主细胞中，并通过细胞培

养的方法研究其体外生长特性，例如生长曲线的变化、病毒量的变化和

病毒复制周期的改变等。

预期成果和意义：

通过本论文的研究，我们预期可以完成对于带有BAC质粒的重组

PRV的构建和基本鉴定，可以对于PRV的基因编辑和重组研究提供一个

可操作性较高的平台。同时，我们还将通过研究重组PRV的体外生长特

性，探究其基因编辑和酶活性的改变对于病毒体外生长过程的影响，对

于PRV的基础研究和疫苗研制提供支持和基础。