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天花粉蛋白对胃癌细胞株ＳＧＣ－7901凋亡影响的体外研究

目的:探讨天花粉蛋白（TCS）抗肿瘤的机制,为TCS在抗肿瘤方面的应用

提供理论依据。方法:采用流程式细胞仪检测胃癌细胞株SGC-7901凋亡。结果：

50、100、200μmol/LTCS能够诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡，凋亡率与剂量呈

正相关，SGC-7901的凋亡随药物浓度及作用时间变化，细胞周期分布呈现G1

期细胞比例逐渐增高，并出现典型的凋亡峰。结论：TCS能诱导胃癌细胞凋亡，

并明显抑制癌细胞增殖，具有抗肿瘤作用。

标签：天花粉蛋白；胃癌；细胞凋亡

天花粉蛋白（TCS）是一种从中药恬楼块根内分离提纯的单链核糖体失活蛋

白，具有抗炎、解热、抗氧化、抗过敏等作用[1]。天花粉蛋白具有抗早孕[2]、

抗HIV[3]、免疫调节[4]及抗肿瘤等多种生物活性，对抗早孕、抗HIV、免疫调

节等机制已进行了大量研究，但有关其抗肿瘤机制研究较少。笔者采用从中药天

花粉中提取的天花粉蛋白作用于胃癌细胞株SGC-7901,从细胞凋亡的角度，探讨

天花粉蛋白诱导胃癌细胞凋亡的作用机制，为中药天花粉蛋白在抗肿瘤方面的应

用提供理论依据。

1实验材料与方法

1.1仪器

流式细胞仪(Fluorescenceactivatedcellsortor，FACS)，AnnexinV-PE，

ApoptosisKitI，CycleTESTTMPLUSDNAReagentKit(均为BectonDickinson公

司试剂）。TCS，江苏天晴制药总厂产品，RPMI1640培养基(Sigma)，

1.2细胞培养

胃癌细胞株SGC-7901用含10%的小牛血清、青霉素(100μmol/L)、链霉素(1

mg/ml)的RPMI1640培养基，置37℃,5%CO2孵箱内静置培养。

1.3早期细胞凋亡的检测

按AnnexinV-PE，ApoptosisKitI操作手册进行检测。

1.4细胞周期变化检测

培养瓶中细胞消化制成单细胞悬液，均匀接种于6孔培养板，2个时段各种

2块板，移入CO2孵箱静置培养。次日，细胞贴壁生长良好。每块板的6个孔

分别设为对照组和不同浓度药物组，每孔加药10μl，使药物终浓度为50、100

μmol/L，将6孔板移入CO2孵箱，在37℃,5%CO2及饱和湿度环境下静置培养。

药物作用48、72h后，分别收集每孔细胞放入FCM检测专用试管中，行FACS

检测。DNA含量分析按CycleTESTTMPLUSDNAReagentKit操作手册进行检

测。

1.5统计学处理

用SPSS10.0软件包处理实验数据，采用ANOVA方法进行统计学分析。

2结果

2.1早期细胞凋亡率

胃癌细胞株SGC-7901在50、100、200μmol/LTCS浓度作用72h，结果提

示凋亡率与剂量呈正相关，分别为9.03%、13.12%、14.15%（表1）。

2.2细胞周期的变化

通过FACS对DNA含量分析结果显示,同对照组细胞相比，50μmol/L的TCS

作用48、72h后，SGC-7901细胞明显阻抑在G1期，并与时间变化呈正相关(表

2)。TCS诱导SGC-7901细胞凋亡的凋亡率与浓度变化呈正相关(表3)。

3讨论

已知细胞凋亡在控制细胞增殖、肿瘤发生和生长中起着重要作用，研究表明，

许多人类恶性肿瘤是其细胞的凋亡过程严重受阻，而使肿瘤细胞在数量上无限制

恶性增生的结果[4]，这种增殖与死亡的平衡失调被认为是由细胞凋亡的调节紊

乱引起的，但在胃癌方面，天花粉蛋白诱导胃癌细胞凋亡的作用机制目前尚不清

楚。本实验研究结果表明TCS具有一定程度上的诱发SGC-7901细胞凋亡的作

用，与对照组存在非常显著性差异(Ｐ0.01)。SGC-7901细胞被明显阻抑在G1

期，TCS能诱导胃癌细胞株SGC-7901凋亡，并与TCS剂量呈正相关。细胞凋

亡与肿瘤发病的关系为抗癌药物的研究提供了新的药理学机制和新靶点[5]，作

为抗肿瘤药若能大量地诱发癌细胞的凋亡，激活其自发的程序性死亡过程，就可

避免因大量细胞坏死而释放胞内物质引