紫外可见分光光度计.ppt

紫外可见分光光度计;第一部分紫外-可见吸收光谱法的原理

第二部分紫外-可见分光光度计构造与类型

第三部分紫外-可见分光光度计的应用

第四部分紫外-可见吸收光谱分析的条件和影响因素

第五部分仪器的使用操作、维护;;一、基本原理:光的选择性吸收;1.朗伯——比尔定律：A＝kbc。

表明：一定温度下，一定波长的单色光通过均匀的、非散射的溶液时，溶液的吸光度与溶液的浓度和液层厚度的乘积成正比。

A＝kbc式中:

A：吸光度；描述溶液对光的吸收程度；

k：摩尔吸光系数，单位L·mol－１·cm－１；

b：液层厚度(光程长度)，通常以cm为单位；

c：溶液的摩尔浓度，单位mol·L－１；

;;;不饱和脂肪族有机化合物;;

基本构造主要由光源、单色器、吸收池、检测器和显示器五大部分组成。

;;;;;基本构造主要由光源、单色器、吸收池、检测器和显示器五大部分组成。

因为普通分光光度法测量高组分含量时，常常偏离朗伯-比尔定律。

（二）按仪器使用的光学系统分类：

ΔＡ＝Aλ2－Aλ1

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室温保持在15～35℃，相对湿度宜控制在45%～80%。

（二）双波长分光光度法

光度计能自动比较两束光的强度，此比值即为试样的透射比，经对数变换将它转换成吸光度并作为波长的函数记录下来。

也不能用毛刷清洗比色皿，以免损伤它的透光面。

（4）是物质吸光能力的量度，可作为定性鉴定的参数；

可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。

一般采用比较光谱法：即在相同的测定条件下，比较待测物与已知标准物的吸收光谱曲线，如果它们的吸收光谱曲线完全等同，则可认为是同一物质。

(一)按仪器使用波长分类：

（２）双光束分光光度计

(c10-2mol/L)。

由标准曲线上查得相应的Δc值，则待测溶液浓度Cx=Cs+Δc

单色器一般由狭缝、色散元件及透镜系统组成。

一般采用比较光谱法：即在相同的测定条件下，比较待测物与已知标准物的吸收光谱曲线??如果它们的吸收光谱曲线完全等同，则可认为是同一物质。

（2）供试样品溶液的配制

紫外-可见吸收光谱法的原理;(一)按仪器使用波长分类：

①真空紫外分光光度计（0.1-200nm）；

②可见分光光度计（350-700nm）；

③紫外-可见分光光度计（190-1100nm）；

④紫外-可见-红外分光光度计（190-2500nm）；

（二）按仪器使用的光学系统分类：

①单光束分光光度计；

②双光束分光光度计

③双波长分光光度计

④动力学分光光度计;（１）单光束分光光度计

经单色器分光后的一束平行光，轮流通过参比溶液和样品溶液，以进行吸光度的测定。

简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。;;;;;;;;;;;二、结构分析

判断所含官能团、有机化合物的同分异构体。

（例如：某一化合物在250-300nm有强吸收带，则表示存在苯环的特征吸收；若在210-350nm有强吸收带，则可能含有两个双键的共轭单位。）

三、纯度鉴定

根据在吸收光谱最大吸收峰的位置和峰形状、数量判断该物质的纯度。

四、定量分析

根据朗伯—比尔定律，物质在一定波长处的吸光度与它的浓度呈线性关系。所以通过测定溶液对一定波长入射光的吸光度，便可求得溶液的浓度和含量。紫外可见分光光度法不仅用于测定微量成分，而且用于常量组分和多组分混合物的测定。;定性分析与定量分析的基础;★同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长λmax。

★同一物质的浓度不同时，光吸收曲线形状相同，最大吸收波长不变，只是相应的吸收度大小不同。

★物质不同，其分子结构不同，则吸收光谱曲线不同，最大吸收波长也不同。

所以可以根据吸收光谱曲线对物质进行定性鉴定和定量分析。

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物质对光的吸收特征，可以用吸收曲线来描述。以入射光的波长λ为横坐标，溶液的吸光度A为纵坐标作图，得到的曲线即为该物质的紫外-可见吸收曲线或吸收光谱。

吸收曲线表明了物质对不同波长的入射光的吸收能力。;;A;;;（二）双波长分光光度法;ΔＡ＝Aλ2－Aλ1

＝（kλ2－kλ1)bc

两波长处测得的吸光度差值ΔＡ与待测组分浓