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拟南芥I型Metacaspases控制细胞死亡

译自ArabidopsisTypeIMetacaspasesControlCellDeath

Science330,1393(2010)DOI:10.1126/science.1194980

在原生动物、真菌和植物中发现的Metacaspases是动物半胱氨酸蛋白酶的远亲。

尽管十年前它们被同源建模发现，现在只有有限的实验数据可以说明它们的功

能。我们已经证明两种I型metacaspases，AtMC1和AtMC2，在拟南芥中拮抗控

制程序性细胞死亡。AtMC1是细胞死亡的正调控因子，实现它的功能需要保守

的蛋白酶类假定的催化残基。AtMC2负调控细胞的死亡。这项功能的实现不需

要假定的催化残基。拟南芥I型metacaspase管理模块的处理几乎能够完全消除

植物细胞内免疫受体激活的细胞死亡超敏反应（hypersensitiveresponse，HR）。

这不会导致加强病原体扩散，而是与HR限制病原体增长脱钩。

程序性细胞死亡对于植物的发展的必需的。植物、真菌和原生动物中的

metacaspases是CD半胱氨酸蛋白酶超家族（caspases,paracaspases,gingipains,

clostripains,legumains,andseparin）中半胱氨酸蛋白酶的远亲同源物。这些与进

化有关的蛋白酶与半胱氨酸蛋白酶-血红蛋白酶有相同的折叠和催化结构域。拟

南芥基因组编码三种I型和六种II型metacaspases（AtMCs）。两种类型都包含保

守的假定催化结构域和合理的自动催化位点但是它们的N-末端结构域不同。尽

管有许多关于植物中半胱氨酸蛋白酶类活动的报告，目前还没有实验数据可以说

明植物I型metacaspases的功能和底物。II型metacaspase功能几乎和谜一样：

重组植物II型metacaspasesAtMC4和AtMC9可以进行离体自动催化过程，并且

Tudor金黄色葡萄球菌核酸酶，在松树细胞程序化死亡过程中被酶切成片段，是

植物中发现的唯一一个体内II型metacaspase底物。虽然经典的动物半胱氨酸蛋

白酶在天冬氨酸之后也就是P1位切割，而metacaspases在普通的氨基酸残基比

如赖氨酸或者精氨酸之后切割。

LSD1是细胞死亡的负调控因子，由超敏反应时的期的超生产启动，细胞的

死亡常伴随着病原体的识别。HR位点在lsd1上正常形成，但是活细胞和死细胞

之间的明显的界限随后消失，并且保证整个叶片的细胞都死亡。这种表型需要一

种蛋白质，而这个蛋白质也是识别病原体和积累水杨酸所必需的。因此，lsd1是

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研究如何控制氧化应激相关的细胞死亡的一个敏感的遗传背景。

所有的三种拟南芥I型metacaspases，AtMC1（Atlg02170）、AtMC2

（At4g25110）和AtMC3（At5g64240），有一个保守的，植物专一性的类LSD1

锌指N-末端模体（CxxCRxxLMYxxGASxVxCxxC）。LSD-1锌指结构域在蛋白质

相互作用中可以发挥作用。在酵母中，LSD1和AtMC1通过它们的锌指结构域

相互作用。相反，在这个分析当中AtMC2和AtMC1或者LSD1都只有微弱的相

互作用。我们证实了AtMC1-LSD1用于转基因拟南芥体内的免疫共沉淀和烟草

瞬时表达分析的相互作用。AtMC1预期的N-末端前域是与LSD1相互作用的。

在这些条件下AtMC2既不和LSD1也不和AtMC1免疫共沉淀。

当Col-0加入后，我们获得了atmc1、atmc2和lsd1的T-DNA插入突变的等

位基因。atmc1，atmc2和atmc1atmc2双重突变型对活性氧的加强没有显示出迹

象，也没有明显的表现型。我们合成lsd1atmc1和lsd1atmc2双重突变型以及lsd1

atmc1atmc2三重突变型来判断是atmc1或者