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AMPK对心肌细胞FOXO1转录因子活性及泛素连接酶

MuRF1表达的影响

陈保林;熊肇军;张成喜;马跃东;蒙荣森;陈广琴;刘晨;董吁钢

【摘要】目的研究AMP激活的蛋白激酶(AMPK)特异性激动剂AICAR对心肌细

胞FOXO1转录因子活性及泛素连接酶MuRF1蛋白表达的影响,探讨AMPK对心

肌细胞蛋白质降解通路的可能作用.方法培养出生1～3d大鼠心肌细胞,用AICAR

干预激活AMPK,并用Westernblotting检测其对FOXO1转录因子活性,以及

MuRF1蛋白表达的影响.结果AICAR能够激活心肌细胞AMPK,与对照组比

较,AMPK激活后显著抑制FOXO1磷酸化(P＜0.01),促进MuRF1蛋白表达(P＜

0.01).结论AMPK可能通过激活心肌细胞FOXO1的转录活性,上调MuRF1蛋白

表达,参与心肌细胞蛋白质降解的调控.

【期刊名称】《南方医科大学学报》

【年(卷),期】2010(030)011

【总页数】4页(P2419-2422)

【关键词】心肌细胞;蛋白水解;AMPK;FOXO;MuRF1

【作者】陈保林;熊肇军;张成喜;马跃东;蒙荣森;陈广琴;刘晨;董吁钢

【作者单位】贵州省人民医院心内科,贵州,贵阳,550002;中山大学附属第一医院心

血管医学部,广东,广州,510080;中山大学附属第三医院心内科,广东,广州,510630;中

山大学附属第三医院心内科,广东,广州,510630;中山大学附属第一医院心血管医学

部,广东,广州,510080;中山大学附属第一医院心血管医学部,广东,广州,510080;中山

大学附属第一医院心血管医学部,广东,广州,510080;中山大学附属第一医院心血管

医学部,广东,广州,510080;中山大学附属第一医院心血管医学部,广东,广州,510080

【正文语种】中文

【中图分类】R329.25;Q591.2

AMP激活的蛋白激酶（AMPK）是一种在真核细胞生物中广泛存在的丝氨酸/苏氨

酸蛋白激酶，在AMP/ATP比例增加时磷酸化激活［1］。AMPK参与调节细胞内

许多反应，是能量代谢的重要调节酶，对调控细胞生长、增殖有重要作用［2］。

AMPK还参与调控心肌细胞蛋白质代谢，可通过抑制哺乳动物雷帕霉素靶体

（mTOR）通路，从而抑制心肌蛋白质合成［1］。在平滑肌，有研究表明AMPK

调控蛋白质降解［3］，然而，AMPK是否参与心肌细胞蛋白质降解的调控国内外

尚无相关报道。在心肌细胞，泛素蛋白酶体系统（UPS）是最重要的蛋白质水解机

制，降解大约80%的细胞内蛋白质［4］。在UPS参与的蛋白水解反应中，泛素

连接酶起了重要的酶促作用，这些酶识别某个蛋白特异性降解信号，结合并催化其

进入降解程序，因此决定了蛋白酶体降解蛋白质的特异性。MuRF1是仅存在于骨

骼肌和心肌中的泛素连接酶，是心肌细胞蛋白降解的关键调节子［5］。研究表明

MuRF1与蛋白质代谢密切相关，其表达增加提示蛋白质降解增加。本研究通过观

察AMPK特异性激动剂AICAR对离体培养心肌细胞泛素连接酶MuRF1表达的影

响，探讨AMPK在调控心肌细胞蛋白质分解代谢中的作用及其可能机制。

1材料和方法

1.1实验动物

出生1～3d的SD乳鼠，清洁级，由中山大学实验动物中心提供。

1.2主要试剂

DMEM/F12培养基（Hyclone），胎牛血清（Hyclone），胰蛋白酶（Gibco），

Ⅰ型胶原酶（Gibco），BrdU（Sigma），AICAR（cellsignaling），

CompoundC（Merk），p-AMPK-α（Thr172）抗体（CST），AMPK-α