丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒及其制备方法 .pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利说明书

(10)申请公布号CN102072957A

(43)申请公布日2011.05.25

(21)申请号CN201110009901.3

(22)申请日2011.01.18

(71)申请人威海威高生物科技有限公司

地址264200山东省威海市高技区世昌大道312号

(72)发明人贾向阳郭兰英蒙红胜姚继承周雷

(74)专利代理机构威海科星专利事务所

代理人王元生

(51)Int.CI

G01N33/576

G01N33/569

G01N33/558

G01N21/76

G01N33/532

G01N33/531

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒及其

制备方法

(57)摘要

本发明属于免疫诊断技术领域，具

体涉及一种微粒子化学发光法丙型肝炎病

毒抗体诊断试剂盒及其制备方法。试剂盒

由测抗HCV磁微粒、测抗HCV示踪结合

物、测抗HCV样品稀释液、质控品组成，

本发明还公开了该诊断试剂盒的制备方

法，其采用的是微粒子化学发光免疫分析

技术，比ELISA具有更高的灵敏度和特异

性，适合于临床HCV的辅助诊断和献血员

筛查，填补了国内微粒子化学发光法检测

HCV抗体诊断试剂生产的空白。

法律状态

法律状态公告日法律状态信息法律状态

权利要求说明书

1.一种丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒，其包括测抗HCV磁微粒、测抗HCV示踪结

合物、测抗HCV样品稀释液、质控品。其特征是：所述测抗HCV磁微粒为标记

有丙肝病毒特异性重组抗原（含盖Core、NS3、NS4、NS5的基因片段）的磁性微

粒子；测抗HCV示踪结合物为标记有特异性抗人IgG的异鲁米诺；测抗HCV样

品稀释液为含牛血清白蛋白的磷酸盐缓冲液；质控品溯源至国家参考品，包括一低

含量HCV抗体的血清和一高含量HCV抗体的血清。

2.一种权利要求1所述丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒的制备方法，其特征是具体步

骤如下：

（1）制备测抗HCV磁微粒将带羧基磁微粒与EDC的重量比为1：2，磁微粒与

丙肝病毒特异性重组抗原（即含盖Core、NS3、NS4、NS5的基因片段）比例为每

毫克磁微粒标记20μg的抗原，在室温下进行标记，标记时间1小时，标记后采用

甘氨酸封闭EDC的多余的位点，使之浓度达到25mM，反应30分钟，洗涤三次，

加入含1%牛血清白蛋白的0.01MPBS，2-8℃保存；

（2）制备测抗HCV示踪结合物特异性抗人IgG与异鲁米诺的标记，反应体系为：

戊二醛最佳使用浓度为1.25%，特异性抗人IgG与异鲁米诺的最佳重量比为2：1，

在室温反应1.5小时，用0.01MPBS（pH7.2-7.4）进行透析，透析后加入等体积甘

油-20℃存放；

（3）制备测抗HCV样品稀释液磷酸二氢钠0.39g/L、磷酸氢二钠2.68g/L、氯化

钠8.50g/L、牛血清白蛋白10g/L、硫柳汞1.0g/L，按上述配方配制稀释液；

（4）质控品溯源至国家参考品，包括质控品1和2，其中质控品1为低含量HCV

抗体的血清，质控品2为高含量HCV抗体的血清。

说明书

技术领域

本发明涉及一种免疫诊断技术，具体地说是一种磁微粒作为载体的丙型肝炎病毒抗

体诊断试剂盒及其制备方法。

背景技术

丙型病毒性肝炎由丙型肝炎病毒（HCV）引起的传染病，呈全世界分布，主要通

过输血或血制品传播，近年发现丙型肝炎也多见于非输血人群，主要通过注射、针

刺、含HC