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丙型肝炎临床检验技术发展现状与展望

作者黄华

【关键词】HCV抗原检测核心抗原核酸检测技术（NAT）同时检测

丙型肝炎是由丙型肝炎病毒（HCV）感染引起的一种重要的世界性传染病[1],

这种病毒主要经由血液传播，也可能存在其他传播途径如母婴传播、性传播和家

庭内接触传播。约有近半数的HCV感染传播途径不明确。丙型肝炎的流行呈全球

性，是欧美及日本等国家终末期肝病的最主要原因。根据WHO统计，全球HCV的

感染率约为3%,估计约2亿人感染了HCV,每年新发丙型肝炎病例约有5万例。目

前尚无治疗丙型肝炎的疫苗，也没有有效的治疗方法。因此防控丙型肝炎传染源

及阻断传播途径最为有效的手段就是早期准确诊断并及时发现HCV感染者。从传

染源和传播途径两方面控制丙型肝炎[2].正因为如此世界各国都在不遗余力地研

究诊断丙型肝炎的新技术。自1989年建立了丙肝病毒抗-HCV检测方法以来，随

着医学检测技术和仪器的不断发展，丙型肝炎的检测技术一直处于不断发展中。

到目前为止，丙型肝炎检测技术主要有抗-HCV检测、HCV-RNA核酸扩增检测、HCV

核心抗原的检测以及同时检测抗-HCV和HCV核心抗原4种类型。本文将对丙型肝

炎临床检验技术的发展与展望做一综述，现报道如下。

1抗-HCV的检测

最早出现的HCV检测技术是抗-HCV的检测。由于HCV在病人外周血液中的含

量及病毒抗原的含量很低，这就使得用常规方法难以直接检测，经过十几年的不

断改进和发展，其检测方法又演变出多种，如双抗原夹心ELISA、间接酶联免疫

吸附实验（间接ELISA）、重组免疫印迹法（RIBA）、蛋白芯片检测法以及免疫层

析法。在这些方法之中，重组免疫印迹法（RIBA）是抗体检测的金标准，蛋白芯

片检测法主要用于抗-HCV的分型。而ELISA由于其操作简单，检测设备廉价，因

此成为应用最广的抗体检测技术。

根据出现时间的先后以及使用抗原的不同，抗-HCV检测技术可分成三代。第

一代抗-HCVIgG试剂盒所用的抗原来自病毒基因组非结构区（C1），它的使用使

HCV的输血感染率下降了8%以上。但其缺陷是灵敏度较低，抗体检出时间较晚，敏

感性也较高，达到8%——9%,但假阳性较高。第二代试剂除了包被C1抗原外又加

入了HCV核心区多肽C22—3和非结构区抗原C33C.抗-C22-3和抗-C33C感染后出

现较早，敏感性和特异性明显提高，感染后8——12周即可检测。且对HCV的特

异性较好，二者联合应用可进一步提高检出率。第三代HCV抗体ELISA试剂中采

用了重组的NSS多肽，核心区抗原比例相对下降，而相应地增加了非结构区的NSS

区C33C抗原的比例，添加了NSS区抗原使其敏感性和特异性得到进一步改善。

上述三代抗-HCV检测方法多采用间接ELISA,虽然也有过双抗原夹心直接检

测抗-HCV的报道[3],但由于HCV抗原存在不稳定性，因此至今仍无商品化的试剂

盒。目前我国市售的抗-HCV试剂盒普遍是采用间接法的第三代抗-HCVELISA试

剂盒和胶体金试剂盒，其特异性可以达到92%——1%.但由于各厂家使用的HCV基

因重组抗原的质量和各抗原片段包被比例有所不同，从而使各厂家试剂的灵敏度

和特异性存在一定的差异，导致抗一HCV检测结果的不一致，产生漏检和假阳性

等[4],未能解决在正常ALT者和健康献血者存在的假阳性问题。加上少部分免疫

功能不正常的HCV感染者，则不能检出抗一HCV.另外，由于“窗口期”的存在，

仍有一定的漏检率[5].目前抗-HCV的检测方法仍有改进的潜力，随着对HCV的研

究不断深入，更多的HCV蛋白会被发现，其中新型核心蛋白和外膜蛋白被认为能

有效提高抗-HCV的灵敏度，但其对抗体的检出率依赖于抗原的获得方法，可能与

抗原的构象表位有关[6,7].

2HCV-RNA核酸扩增检测技术（Nucleic-acidAmplificationTechnologyNAT）

从外周血中检出HCVRNA是HCV复制活跃的可靠指标，在感染2个星期内的

血清中可检测到HCVRNA,在感染自然恢复前血清中HCVRNA将达到一个高峰[8],

目前NAT检测被国内外部分机构作为HCV感